发酵科技通讯
髮酵科技通訊
발효과기통신
FAXIAO KEJI TONGXUN
2013年
4期
1-4
,共4页
沈爱萍%何宝龙%孙丽慧%郑裕国
瀋愛萍%何寶龍%孫麗慧%鄭裕國
침애평%하보룡%손려혜%정유국
重组大肠杆菌%核苷磷酸转移酶%发酵%条件优化
重組大腸桿菌%覈苷燐痠轉移酶%髮酵%條件優化
중조대장간균%핵감린산전이매%발효%조건우화
核苷磷酸转移酶能够特异地将无机焦磷酸(PPi)的磷酸根转移到核苷5'-位的羟基上,该过程并不需要ATP的参与,且具有选择性高和反应条件温和等特点.以实验室前期构建的重组大肠杆菌E.coli BL21 (DE3)/pET28b-AP/PT为菌株,进行了5L发酵罐中的培养条件优化,确定了以乳糖作为诱导剂时,最佳诱导时机OD600为7左右,诱导剂乳糖的浓度为10 g/L;确定了最适通气量为1.5 L/min.在该条件下,核苷磷酸转移酶酶活达221.4 U/L,OD600为20.4.
覈苷燐痠轉移酶能夠特異地將無機焦燐痠(PPi)的燐痠根轉移到覈苷5'-位的羥基上,該過程併不需要ATP的參與,且具有選擇性高和反應條件溫和等特點.以實驗室前期構建的重組大腸桿菌E.coli BL21 (DE3)/pET28b-AP/PT為菌株,進行瞭5L髮酵罐中的培養條件優化,確定瞭以乳糖作為誘導劑時,最佳誘導時機OD600為7左右,誘導劑乳糖的濃度為10 g/L;確定瞭最適通氣量為1.5 L/min.在該條件下,覈苷燐痠轉移酶酶活達221.4 U/L,OD600為20.4.
핵감린산전이매능구특이지장무궤초린산(PPi)적린산근전이도핵감5'-위적간기상,해과정병불수요ATP적삼여,차구유선택성고화반응조건온화등특점.이실험실전기구건적중조대장간균E.coli BL21 (DE3)/pET28b-AP/PT위균주,진행료5L발효관중적배양조건우화,학정료이유당작위유도제시,최가유도시궤OD600위7좌우,유도제유당적농도위10 g/L;학정료최괄통기량위1.5 L/min.재해조건하,핵감린산전이매매활체221.4 U/L,OD600위20.4.
