北京大学学报（医学版）
北京大學學報（醫學版）
북경대학학보（의학판）
JOURNAL OF BEIJING MEDICAL UNIVERSITY(HEALTH SCIENCES)
2013年
6期
852-858
,共7页
沈晓婷%徐艳文%钟依平%曾艳红%王静%丁晨晖%邢卫杰%周灿权
瀋曉婷%徐豔文%鐘依平%曾豔紅%王靜%丁晨暉%邢衛傑%週燦權
침효정%서염문%종의평%증염홍%왕정%정신휘%형위걸%주찬권
植入前诊断%基因扩增%微卫星重复
植入前診斷%基因擴增%微衛星重複
식입전진단%기인확증%미위성중복
Preimplantation diagnosis%Gene amplification%Microsatellite repeats
目的:探讨多重置换扩增(multiple displacement amplification,MDA)结合短串联重复序列多态性在植入前遗传学诊断(preimplantation genetic diagnosis,PGD)中的应用.方法:采用多重置换扩增对单细胞进行全基因组扩增,针对单基因疾病和人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)配型选择位于致病基因内部或两侧的短串联重复序列位点进行单体型分析,同时对致病基因进行直接检测;针对染色体数量及结构异常或非整倍体筛查,选择位于相关染色体上的短串联重复序列位点进行等位基因数分析.结果:进行了以下5类12种类型植入前遗传学诊断的临床应用:(1)单基因疾病:脊髓性肌萎缩症、杜氏肌营养不良、X-连锁慢性肉芽肿、石骨症、骨软骨发育不全、X-连锁免疫缺陷综合征;(2)同时合并两种单基因疾病:α-和β-双重地中海贫血;(3)染色体罗氏易位;(4)单基因疾病结合HLA配型:β-地中海贫血、杜氏肌营养不良;(5)单基因疾病合并染色体异常:α-地中海贫血合并染色体罗氏易位、α-地中海贫血合并性染色体数目异常.对35个家系共进行了44个周期的PGD,共47个移植周期.MDA扩增成功率为96.4％(374/388),后续PCR扩增效率为97.1％,等位基因脱扣(allele drop out,ADO)率为12.6％(波动于0～ 47.5％),总体诊断效率为94.6％(367/388).47个移植周期共移植91个胚胎,种植率为30.7％(28/91).临床妊娠率为47.7％/PGD周期(21/44),共诞生了20个健康婴儿(12例单胎,4例双胎),5例继续妊娠.结论:采用多重置换扩增结合短串联重复序列多态性可建立一个通用的植入前遗传学诊断平台,其很大程度上缩短了新病种植入前遗传学诊断体系的研发时间,而且可同时进行两种或两种以上遗传学状态的诊断,也提高了诊断效率,有利于进一步拓宽植入前遗传学诊断的适应征.
目的:探討多重置換擴增(multiple displacement amplification,MDA)結閤短串聯重複序列多態性在植入前遺傳學診斷(preimplantation genetic diagnosis,PGD)中的應用.方法:採用多重置換擴增對單細胞進行全基因組擴增,針對單基因疾病和人類白細胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)配型選擇位于緻病基因內部或兩側的短串聯重複序列位點進行單體型分析,同時對緻病基因進行直接檢測;針對染色體數量及結構異常或非整倍體篩查,選擇位于相關染色體上的短串聯重複序列位點進行等位基因數分析.結果:進行瞭以下5類12種類型植入前遺傳學診斷的臨床應用:(1)單基因疾病:脊髓性肌萎縮癥、杜氏肌營養不良、X-連鎖慢性肉芽腫、石骨癥、骨軟骨髮育不全、X-連鎖免疫缺陷綜閤徵;(2)同時閤併兩種單基因疾病:α-和β-雙重地中海貧血;(3)染色體囉氏易位;(4)單基因疾病結閤HLA配型:β-地中海貧血、杜氏肌營養不良;(5)單基因疾病閤併染色體異常:α-地中海貧血閤併染色體囉氏易位、α-地中海貧血閤併性染色體數目異常.對35箇傢繫共進行瞭44箇週期的PGD,共47箇移植週期.MDA擴增成功率為96.4％(374/388),後續PCR擴增效率為97.1％,等位基因脫釦(allele drop out,ADO)率為12.6％(波動于0～ 47.5％),總體診斷效率為94.6％(367/388).47箇移植週期共移植91箇胚胎,種植率為30.7％(28/91).臨床妊娠率為47.7％/PGD週期(21/44),共誕生瞭20箇健康嬰兒(12例單胎,4例雙胎),5例繼續妊娠.結論:採用多重置換擴增結閤短串聯重複序列多態性可建立一箇通用的植入前遺傳學診斷平檯,其很大程度上縮短瞭新病種植入前遺傳學診斷體繫的研髮時間,而且可同時進行兩種或兩種以上遺傳學狀態的診斷,也提高瞭診斷效率,有利于進一步拓寬植入前遺傳學診斷的適應徵.
목적:탐토다중치환확증(multiple displacement amplification,MDA)결합단천련중복서렬다태성재식입전유전학진단(preimplantation genetic diagnosis,PGD)중적응용.방법:채용다중치환확증대단세포진행전기인조확증,침대단기인질병화인류백세포항원(human leukocyte antigen,HLA)배형선택위우치병기인내부혹량측적단천련중복서렬위점진행단체형분석,동시대치병기인진행직접검측;침대염색체수량급결구이상혹비정배체사사,선택위우상관염색체상적단천련중복서렬위점진행등위기인수분석.결과:진행료이하5류12충류형식입전유전학진단적림상응용:(1)단기인질병:척수성기위축증、두씨기영양불량、X-련쇄만성육아종、석골증、골연골발육불전、X-련쇄면역결함종합정;(2)동시합병량충단기인질병:α-화β-쌍중지중해빈혈;(3)염색체라씨역위;(4)단기인질병결합HLA배형:β-지중해빈혈、두씨기영양불량;(5)단기인질병합병염색체이상:α-지중해빈혈합병염색체라씨역위、α-지중해빈혈합병성염색체수목이상.대35개가계공진행료44개주기적PGD,공47개이식주기.MDA확증성공솔위96.4％(374/388),후속PCR확증효솔위97.1％,등위기인탈구(allele drop out,ADO)솔위12.6％(파동우0～ 47.5％),총체진단효솔위94.6％(367/388).47개이식주기공이식91개배태,충식솔위30.7％(28/91).림상임신솔위47.7％/PGD주기(21/44),공탄생료20개건강영인(12례단태,4례쌍태),5례계속임신.결론:채용다중치환확증결합단천련중복서렬다태성가건립일개통용적식입전유전학진단평태,기흔대정도상축단료신병충식입전유전학진단체계적연발시간,이차가동시진행량충혹량충이상유전학상태적진단,야제고료진단효솔,유리우진일보탁관식입전유전학진단적괄응정.
