CAJ | 학술논문

目的:通过建立氧化磷酸化(oxidative phosphorylation,OXPHOS)活性抑制模型,分析线粒体能量代谢在卵子成熟、受精和胚胎发育过程中的作用.方法:卵子体外成熟培养液中引入10和100 nmol/L羰基氰4-(三氟甲氧基)苯腙[carbonyl cyanide p-(tri-fluromethoxy) phenyl-hydrazone,FCCP],以特异性抑制线粒体OXPHOS活性,分析卵子线粒体膜电位强度、三磷酸腺苷含量以及线粒体DNA拷贝数,以验证FCCP效应;检测卵子的活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量、纺缍体和染色体结构完整性,并统计分析卵子体外生发泡破裂(germinal vesicle breakdown,GVBD)率、核成熟率、受精率及囊胚形成率.结果:FCCP(10和100nmol/L)处理组与对照组相比,卵子的核成熟率(55.8％和47.3％,vs.62.9％)、纺锤体/染色体结构完整率(37.9％和34.7％,vs.61.9％)、ROS水平(0.67和0.59,vs.0.94)和囊胚形成率(57.9％和41.8％,vs.68.3％)均有显著降低(P＜0.05);而FCCP处理对卵子的GVBD发生率和体外受精率均没有显著影响(P＞0.05).结论:线粒体能量缺乏显著降低卵子的核成熟率、ROS生成、纺锤体/染色体结构完整率和囊胚形成率,但对卵子的GVBD发生率和受精率没有显著改变.
목적:통과건립양화린산화(oxidative phosphorylation,OXPHOS)활성억제모형,분석선립체능량대사재란자성숙、수정화배태발육과정중적작용.방법:란자체외성숙배양액중인입10화100 nmol/L탄기청4-(삼불갑양기)분종[carbonyl cyanide p-(tri-fluromethoxy) phenyl-hydrazone,FCCP],이특이성억제선립체OXPHOS활성,분석란자선립체막전위강도、삼린산선감함량이급선립체DNA고패수,이험증FCCP효응;검측란자적활성양(reactive oxygen species,ROS)함량、방타체화염색체결구완정성,병통계분석란자체외생발포파렬(germinal vesicle breakdown,GVBD)솔、핵성숙솔、수정솔급낭배형성솔.결과:FCCP(10화100nmol/L)처리조여대조조상비,란자적핵성숙솔(55.8％화47.3％,vs.62.9％)、방추체/염색체결구완정솔(37.9％화34.7％,vs.61.9％)、ROS수평(0.67화0.59,vs.0.94)화낭배형성솔(57.9％화41.8％,vs.68.3％)균유현저강저(P＜0.05);이FCCP처리대란자적GVBD발생솔화체외수정솔균몰유현저영향(P＞0.05).결론:선립체능량결핍현저강저란자적핵성숙솔、ROS생성、방추체/염색체결구완정솔화낭배형성솔,단대란자적GVBD발생솔화수정솔몰유현저개변.