微生物与感染
微生物與感染
미생물여감염
JOURNAL OF MICROBES AND INFECTION
2009年
3期
140-145,151
,共7页
蒋定锋%闫梁%贲海静%赵艳丰%秦智强%瞿涤
蔣定鋒%閆樑%賁海靜%趙豔豐%秦智彊%瞿滌
장정봉%염량%분해정%조염봉%진지강%구조
鸭乙型肝炎病毒%核心抗原%克隆%DNA疫苗
鴨乙型肝炎病毒%覈心抗原%剋隆%DNA疫苗
압을형간염병독%핵심항원%극륭%DNA역묘
为研究鸭乙型肝炎病毒核心抗原(DHBcAg)真核表达质粒的免疫原性,分析DHBcAg DNA疫苗诱导的体液免疫应答,首先借助生物信息学方法对鸭乙型肝炎病毒(DHBV) Core基因编码的氨基酸序列进行亲疏水性分析,分别构建DHBcAg全基因(E-DHBc263)及去除疏水性序列的DHBcAg片段(E-DHBc180)的真核表达质粒,间接免疫荧光检测结果显示可在COS7细胞内表达.进一步构建原核表达质粒p-DHBc263和p-DHBc180,仅p-DHBc180可表达蛋白,纯化后作为酶联免疫吸附试验(ELISA)包被抗原,用于DHBcAb的检测.分别用E-DHBc263和E-DHBc180免疫小鼠,采用间接ELISA检测DHBcAb.结果显示,E-DHBc180可诱导免疫小鼠产生DHBcAb免疫应答,加强免疫后效价可达1∶ 100～1∶ 400.结果提示,E-DHBc180可作为DHBcAg DNA疫苗,在DHBV感染鸭模型中评价其效果.
為研究鴨乙型肝炎病毒覈心抗原(DHBcAg)真覈錶達質粒的免疫原性,分析DHBcAg DNA疫苗誘導的體液免疫應答,首先藉助生物信息學方法對鴨乙型肝炎病毒(DHBV) Core基因編碼的氨基痠序列進行親疏水性分析,分彆構建DHBcAg全基因(E-DHBc263)及去除疏水性序列的DHBcAg片段(E-DHBc180)的真覈錶達質粒,間接免疫熒光檢測結果顯示可在COS7細胞內錶達.進一步構建原覈錶達質粒p-DHBc263和p-DHBc180,僅p-DHBc180可錶達蛋白,純化後作為酶聯免疫吸附試驗(ELISA)包被抗原,用于DHBcAb的檢測.分彆用E-DHBc263和E-DHBc180免疫小鼠,採用間接ELISA檢測DHBcAb.結果顯示,E-DHBc180可誘導免疫小鼠產生DHBcAb免疫應答,加彊免疫後效價可達1∶ 100～1∶ 400.結果提示,E-DHBc180可作為DHBcAg DNA疫苗,在DHBV感染鴨模型中評價其效果.
위연구압을형간염병독핵심항원(DHBcAg)진핵표체질립적면역원성,분석DHBcAg DNA역묘유도적체액면역응답,수선차조생물신식학방법대압을형간염병독(DHBV) Core기인편마적안기산서렬진행친소수성분석,분별구건DHBcAg전기인(E-DHBc263)급거제소수성서렬적DHBcAg편단(E-DHBc180)적진핵표체질립,간접면역형광검측결과현시가재COS7세포내표체.진일보구건원핵표체질립p-DHBc263화p-DHBc180,부p-DHBc180가표체단백,순화후작위매련면역흡부시험(ELISA)포피항원,용우DHBcAb적검측.분별용E-DHBc263화E-DHBc180면역소서,채용간접ELISA검측DHBcAb.결과현시,E-DHBc180가유도면역소서산생DHBcAb면역응답,가강면역후효개가체1∶ 100～1∶ 400.결과제시,E-DHBc180가작위DHBcAg DNA역묘,재DHBV감염압모형중평개기효과.
