四川大学学报(自然科学版)
四川大學學報(自然科學版)
사천대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF SICHUAN UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2009年
4期
1176-1180
,共5页
宁允叶%韩素霞%王柏丁%李继琼%文富强
寧允葉%韓素霞%王柏丁%李繼瓊%文富彊
저윤협%한소하%왕백정%리계경%문부강
低氧%人支气管上皮细胞%热休克蛋白70%低氧诱导因子-1α
低氧%人支氣管上皮細胞%熱休剋蛋白70%低氧誘導因子-1α
저양%인지기관상피세포%열휴극단백70%저양유도인자-1α
将人支气管上皮细胞(HBE)在低糖DMEM培养基、1%O2培养不同时间后,分别用RT-PCR和Western blot方法检测细胞HSP70、HIF-1α的mRNA和蛋白表达水平,同时采用免疫组化技术观察低氧对HSP70蛋白的影响.对照组培养于低糖、常氧条件下.结果表明,低氧条件下,HBE细胞HSP70 mRNA和蛋白表达都有时间依赖性.在1 h时HSP70mRNA转录水平即开始增加,与对照相比差异显著(P<0.05);在12 h时转录水平最高;而HSP70蛋白的表达略有滞后,在3 h差异显著(P<0.05).低氧诱导因子HIF-1αmRNA水平在1 h时显著升高,在6 h和12 h时与对照相比差异极显著(P<0.01);HIF-1α蛋白的表达也同步增加,在6 h时达到峰值.这为慢性阻塞性肺疾病(COPD)的发病机制研究提供了一种可供选择的细胞模型.
將人支氣管上皮細胞(HBE)在低糖DMEM培養基、1%O2培養不同時間後,分彆用RT-PCR和Western blot方法檢測細胞HSP70、HIF-1α的mRNA和蛋白錶達水平,同時採用免疫組化技術觀察低氧對HSP70蛋白的影響.對照組培養于低糖、常氧條件下.結果錶明,低氧條件下,HBE細胞HSP70 mRNA和蛋白錶達都有時間依賴性.在1 h時HSP70mRNA轉錄水平即開始增加,與對照相比差異顯著(P<0.05);在12 h時轉錄水平最高;而HSP70蛋白的錶達略有滯後,在3 h差異顯著(P<0.05).低氧誘導因子HIF-1αmRNA水平在1 h時顯著升高,在6 h和12 h時與對照相比差異極顯著(P<0.01);HIF-1α蛋白的錶達也同步增加,在6 h時達到峰值.這為慢性阻塞性肺疾病(COPD)的髮病機製研究提供瞭一種可供選擇的細胞模型.
장인지기관상피세포(HBE)재저당DMEM배양기、1%O2배양불동시간후,분별용RT-PCR화Western blot방법검측세포HSP70、HIF-1α적mRNA화단백표체수평,동시채용면역조화기술관찰저양대HSP70단백적영향.대조조배양우저당、상양조건하.결과표명,저양조건하,HBE세포HSP70 mRNA화단백표체도유시간의뢰성.재1 h시HSP70mRNA전록수평즉개시증가,여대조상비차이현저(P<0.05);재12 h시전록수평최고;이HSP70단백적표체략유체후,재3 h차이현저(P<0.05).저양유도인자HIF-1αmRNA수평재1 h시현저승고,재6 h화12 h시여대조상비차이겁현저(P<0.01);HIF-1α단백적표체야동보증가,재6 h시체도봉치.저위만성조새성폐질병(COPD)적발병궤제연구제공료일충가공선택적세포모형.