CAJ | 학술논문

头孢菌素酰化酶AcyⅡ可以直接水解CPC生成7-ACA,后者是重要的医药中间体,用来合成头孢类抗生素。头孢菌素酰化酶S12是AcyⅡ的突变体,其催化效率比AcyⅡ高。本文通过优化头孢菌素酰化酶S12在大肠杆菌BL21（DE3）中的诱导表达条件,为确定周期短、产率高且稳定可靠的发酵工艺奠定基础。利用单因素和正交设计对装液量、接种量、诱导时间,诱导温度和IPTG浓度等发酵条件进行了考察。单因素结果表明：装液量为25mL/250mL三角瓶,接种量1%,指数生长开始加入0.05mM IPTG,28℃诱导20小时发酵液酶活最高;正交试验结果表明：装液量50mL/250mL三角瓶,接种量2%,指数生长开始加入0.05mM IPTG,诱导28℃且诱导24hours酶活最高,发酵液产酶水平达639.9U/L。方差分析结果显示,发酵时间和装液量对酶活影响极显著,诱导时机对酶活影响显著,接种量对酶活没有显著影响。验证实验发现,发酵液产酶水平最高可以达到802.9U/L。本实验为该工程菌的发酵研究提供了最佳的表达诱导条件,对下一步的研究具有指导意义。
두포균소선화매AcyⅡ가이직접수해CPC생성7-ACA,후자시중요적의약중간체,용래합성두포류항생소。두포균소선화매S12시AcyⅡ적돌변체,기최화효솔비AcyⅡ고。본문통과우화두포균소선화매S12재대장간균BL21（DE3）중적유도표체조건,위학정주기단、산솔고차은정가고적발효공예전정기출。이용단인소화정교설계대장액량、접충량、유도시간,유도온도화IPTG농도등발효조건진행료고찰。단인소결과표명：장액량위25mL/250mL삼각병,접충량1%,지수생장개시가입0.05mM IPTG,28℃유도20소시발효액매활최고;정교시험결과표명：장액량50mL/250mL삼각병,접충량2%,지수생장개시가입0.05mM IPTG,유도28℃차유도24hours매활최고,발효액산매수평체639.9U/L。방차분석결과현시,발효시간화장액량대매활영향겁현저,유도시궤대매활영향현저,접충량대매활몰유현저영향。험증실험발현,발효액산매수평최고가이체도802.9U/L。본실험위해공정균적발효연구제공료최가적표체유도조건,대하일보적연구구유지도의의。