CAJ | 학술논문

目的:研究靶向人白血病K562细胞内高表达的三磷酸腺苷结合盒转运体G2(ATP binding cassette transporter G2,ABCG2)基因的RNA干扰(RNA interference,RNAi)对K562细胞化疗敏感性的影响.方法:构建靶向ABCG2基因的RNAi重组腺病毒Ad-siABCG2,以其感染K562细胞后,采用RT-PCR、免疫细胞化学和Western印迹法检测K562细胞中ABCG2 mRNA和蛋白的表达,MTT法检测K562细胞对药物的敏感性变化,FCM检测细胞内多柔比星(adriamycin,ADM)和柔红霉素(daunorubicin, DNR)的平均荧光强度.结果:成功构建靶向ABCG2的RNAi重组腺病毒Ad-siABCG2,经感染K562细胞后可有效沉默ABCG2基因表达;MTT检测发现,感染Ad-siABCG2的K562细胞对ADM和DNR的敏感性是未感染时的2～6倍(P＜0.01);FCM检测显示,感染Ad-siABCG2的K562细胞内DNR和ADM平均荧光强度(86.19和180.26)分别高于未感染的K562细胞(63.65和141.60),差异有统计学意义(P＜0.05).结论:重组腺病毒Ad-siABCG2沉默ABCG2基因表达可增加K562细胞对ADM和DNR的敏感性,表明ABCG2基因表达可导致K562细胞产生多药耐药;Ad-siABCG2对ABCG2介导的细胞多药耐药有逆转作用.
목적:연구파향인백혈병K562세포내고표체적삼린산선감결합합전운체G2(ATP binding cassette transporter G2,ABCG2)기인적RNA간우(RNA interference,RNAi)대K562세포화료민감성적영향.방법:구건파향ABCG2기인적RNAi중조선병독Ad-siABCG2,이기감염K562세포후,채용RT-PCR、면역세포화학화Western인적법검측K562세포중ABCG2 mRNA화단백적표체,MTT법검측K562세포대약물적민감성변화,FCM검측세포내다유비성(adriamycin,ADM)화유홍매소(daunorubicin, DNR)적평균형광강도.결과:성공구건파향ABCG2적RNAi중조선병독Ad-siABCG2,경감염K562세포후가유효침묵ABCG2기인표체;MTT검측발현,감염Ad-siABCG2적K562세포대ADM화DNR적민감성시미감염시적2～6배(P＜0.01);FCM검측현시,감염Ad-siABCG2적K562세포내DNR화ADM평균형광강도(86.19화180.26)분별고우미감염적K562세포(63.65화141.60),차이유통계학의의(P＜0.05).결론:중조선병독Ad-siABCG2침묵ABCG2기인표체가증가K562세포대ADM화DNR적민감성,표명ABCG2기인표체가도치K562세포산생다약내약;Ad-siABCG2대ABCG2개도적세포다약내약유역전작용.