中华神经外科疾病研究杂志
中華神經外科疾病研究雜誌
중화신경외과질병연구잡지
CHINESE JOURNAL OF NEUROSURGICAL DISEASE RESEARCH
2013年
5期
421-425
,共5页
马献昆%李建华%宋丽惠%郭欣茹%王淑为%刘爽
馬獻昆%李建華%宋麗惠%郭訢茹%王淑為%劉爽
마헌곤%리건화%송려혜%곽흔여%왕숙위%류상
神经干细胞%成人脑组织%增殖%分化%迁移
神經榦細胞%成人腦組織%增殖%分化%遷移
신경간세포%성인뇌조직%증식%분화%천이
Neural stem cells%Adult brain%Proliferation%Differentiation%Migration
目的 探索从成人脑组织获取的神经干细胞(成人-hNSCs)在体外的增殖能力、分化特性、以及在裸鼠颅内的存活、迁移及分化情况.方法 分别留取癫痫患者手术切除的颞叶脑组织和10 w左右人类自然流产胎儿纹状体组织,体外分离成单细胞悬液,无血清培养基培养、传代并诱导分化.软琼脂糖集落形成实验检测NSCs的增殖能力.免疫荧光法检测NSCs标志物神经上皮巢蛋白(Nestin)和诱导分化后神经元标志物β-tubllin以及神经胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达；利用动物立体定向仪将体外悬浮培养2w的人NSCs移植入裸鼠颅内,检测NSCs在裸鼠脑组织局部的存活、迁移和分化状况.结果 成人-hNSCs集落形成能力较胚胎脑组织来源的NSCs(胎儿-hNSCs)明显减弱,免疫荧光染色显示分离的NSCs呈Nestin阳性,诱导分化后可见(β-tubllin和GFAP 阳性的神经细胞,其中80％的细胞为GFAP阳性的星形胶质细胞,20％左右为p-tubllin阳性细胞.分别将成人-hNSCs和胎儿-hNSCs移植入裸鼠纹状体,1个月后,冰冻切片,荧光显微镜观察到来源于成人脑组织来源的NSCs仅见沿针道的近距离迁移,免疫荧光染色在成人-hNSCs移植裸鼠颅内只检测到GFAP阳性的星形胶质细胞.而胎儿-hNSCs可穿过针道,沿大脑廉向脑实质广泛迁移,免疫荧光染色能检测到GFAP和少量(β-tubllin阳性细胞.结论 成人脑组织和胚胎纹状体组织中均能成功分离到神经前体细胞,而与胎儿-hNSCs相比,成人-hNSCs体外增殖能力、多向分化潜能和体内迁移能力都明显减弱.
目的 探索從成人腦組織穫取的神經榦細胞(成人-hNSCs)在體外的增殖能力、分化特性、以及在裸鼠顱內的存活、遷移及分化情況.方法 分彆留取癲癇患者手術切除的顳葉腦組織和10 w左右人類自然流產胎兒紋狀體組織,體外分離成單細胞懸液,無血清培養基培養、傳代併誘導分化.軟瓊脂糖集落形成實驗檢測NSCs的增殖能力.免疫熒光法檢測NSCs標誌物神經上皮巢蛋白(Nestin)和誘導分化後神經元標誌物β-tubllin以及神經膠質細胞標誌物膠質纖維痠性蛋白(GFAP)的錶達；利用動物立體定嚮儀將體外懸浮培養2w的人NSCs移植入裸鼠顱內,檢測NSCs在裸鼠腦組織跼部的存活、遷移和分化狀況.結果 成人-hNSCs集落形成能力較胚胎腦組織來源的NSCs(胎兒-hNSCs)明顯減弱,免疫熒光染色顯示分離的NSCs呈Nestin暘性,誘導分化後可見(β-tubllin和GFAP 暘性的神經細胞,其中80％的細胞為GFAP暘性的星形膠質細胞,20％左右為p-tubllin暘性細胞.分彆將成人-hNSCs和胎兒-hNSCs移植入裸鼠紋狀體,1箇月後,冰凍切片,熒光顯微鏡觀察到來源于成人腦組織來源的NSCs僅見沿針道的近距離遷移,免疫熒光染色在成人-hNSCs移植裸鼠顱內隻檢測到GFAP暘性的星形膠質細胞.而胎兒-hNSCs可穿過針道,沿大腦廉嚮腦實質廣汎遷移,免疫熒光染色能檢測到GFAP和少量(β-tubllin暘性細胞.結論 成人腦組織和胚胎紋狀體組織中均能成功分離到神經前體細胞,而與胎兒-hNSCs相比,成人-hNSCs體外增殖能力、多嚮分化潛能和體內遷移能力都明顯減弱.
목적 탐색종성인뇌조직획취적신경간세포(성인-hNSCs)재체외적증식능력、분화특성、이급재라서로내적존활、천이급분화정황.방법 분별류취전간환자수술절제적섭협뇌조직화10 w좌우인류자연유산태인문상체조직,체외분리성단세포현액,무혈청배양기배양、전대병유도분화.연경지당집락형성실험검측NSCs적증식능력.면역형광법검측NSCs표지물신경상피소단백(Nestin)화유도분화후신경원표지물β-tubllin이급신경효질세포표지물효질섬유산성단백(GFAP)적표체；이용동물입체정향의장체외현부배양2w적인NSCs이식입라서로내,검측NSCs재라서뇌조직국부적존활、천이화분화상황.결과 성인-hNSCs집락형성능력교배태뇌조직래원적NSCs(태인-hNSCs)명현감약,면역형광염색현시분리적NSCs정Nestin양성,유도분화후가견(β-tubllin화GFAP 양성적신경세포,기중80％적세포위GFAP양성적성형효질세포,20％좌우위p-tubllin양성세포.분별장성인-hNSCs화태인-hNSCs이식입라서문상체,1개월후,빙동절편,형광현미경관찰도래원우성인뇌조직래원적NSCs부견연침도적근거리천이,면역형광염색재성인-hNSCs이식라서로내지검측도GFAP양성적성형효질세포.이태인-hNSCs가천과침도,연대뇌렴향뇌실질엄범천이,면역형광염색능검측도GFAP화소량(β-tubllin양성세포.결론 성인뇌조직화배태문상체조직중균능성공분리도신경전체세포,이여태인-hNSCs상비,성인-hNSCs체외증식능력、다향분화잠능화체내천이능력도명현감약.
