中国比较医学杂志
中國比較醫學雜誌
중국비교의학잡지
CHINESE JOURNAL OF COMPARATIVE MEDICINE
2013年
9期
68-72,60
,共6页
王静%张鈺%闵凡贵%袁文%赵维波
王靜%張鈺%閔凡貴%袁文%趙維波
왕정%장옥%민범귀%원문%조유파
猴免疫缺陷病毒(SIV)%实时荧光定量PCR(Q-PCR)%TaqMan探针
猴免疫缺陷病毒(SIV)%實時熒光定量PCR(Q-PCR)%TaqMan探針
후면역결함병독(SIV)%실시형광정량PCR(Q-PCR)%TaqMan탐침
Simian immunodeficiency virus(SIV)%QPCR%TaqMan probe
目的 建立快速、敏感、特异的猴免疫缺陷病毒(SIV) TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法,对SIV病毒核酸进行定量检测.方法 RT-PCR扩增SIVmac251保守gag基因序列796 bp片段,进行TA克隆,构建标准品质粒pMD-SIVgag.通过对SIV定量外标准品的定量分析,优化反应体系,检测TaqMan探针实时荧光定量PCR方法的灵敏度、特异性和重复性.结果 所建立的SIV QPCR检测方法,质粒DNA模板在107～102拷贝之间表现较好线性和相关性,标准曲线所得斜率为-3.26,相关系数为0.999.检测灵敏度达到200拷贝,方法重复性测试,检测25份临床样品CV％均小于1％.结论 建立的SIV QPCR检测方法特异性、敏感性高,稳定性好,可用于定量测定猴免疫缺陷病毒(SIV)核酸拷贝量.
目的 建立快速、敏感、特異的猴免疫缺陷病毒(SIV) TaqMan探針實時熒光定量PCR檢測方法,對SIV病毒覈痠進行定量檢測.方法 RT-PCR擴增SIVmac251保守gag基因序列796 bp片段,進行TA剋隆,構建標準品質粒pMD-SIVgag.通過對SIV定量外標準品的定量分析,優化反應體繫,檢測TaqMan探針實時熒光定量PCR方法的靈敏度、特異性和重複性.結果 所建立的SIV QPCR檢測方法,質粒DNA模闆在107～102拷貝之間錶現較好線性和相關性,標準麯線所得斜率為-3.26,相關繫數為0.999.檢測靈敏度達到200拷貝,方法重複性測試,檢測25份臨床樣品CV％均小于1％.結論 建立的SIV QPCR檢測方法特異性、敏感性高,穩定性好,可用于定量測定猴免疫缺陷病毒(SIV)覈痠拷貝量.
목적 건립쾌속、민감、특이적후면역결함병독(SIV) TaqMan탐침실시형광정량PCR검측방법,대SIV병독핵산진행정량검측.방법 RT-PCR확증SIVmac251보수gag기인서렬796 bp편단,진행TA극륭,구건표준품질립pMD-SIVgag.통과대SIV정량외표준품적정량분석,우화반응체계,검측TaqMan탐침실시형광정량PCR방법적령민도、특이성화중복성.결과 소건립적SIV QPCR검측방법,질립DNA모판재107～102고패지간표현교호선성화상관성,표준곡선소득사솔위-3.26,상관계수위0.999.검측령민도체도200고패,방법중복성측시,검측25빈림상양품CV％균소우1％.결론 건립적SIV QPCR검측방법특이성、민감성고,은정성호,가용우정량측정후면역결함병독(SIV)핵산고패량.
