华南国防医学杂志
華南國防醫學雜誌
화남국방의학잡지
MILLITARY MEDICAL JOURNAL OF SOUTH CHINA
2009年
5期
53-56
,共4页
苏明威%辛华雯%李维亮%熊磊%余爱荣%李罄%王乃平
囌明威%辛華雯%李維亮%熊磊%餘愛榮%李罄%王迺平
소명위%신화문%리유량%웅뢰%여애영%리경%왕내평
CYP 3A%肝微粒体%咪达唑仑%1′-羟基咪达唑仑%高效液相色谱
CYP 3A%肝微粒體%咪達唑崙%1′-羥基咪達唑崙%高效液相色譜
CYP 3A%간미립체%미체서륜%1′-간기미체서륜%고효액상색보
目的 建立一种快速、准确的以咪达唑仑作为"探针药物"评价或测定细胞色素酶(CYP3A4)酶活性的高效液相色谱(high-performance liquid chromatography,HPLC)-紫外检测(UV detection,VWD)方法.方法 采用的色谱柱为依立特C18柱(4.6 mm×100 mm,5 μm),流速0.8 ml/min,紫外检测波长254 nm,柱温40 ℃.咪达唑仑(midazolam,MDZ)与大鼠肝微粒体温孵后,加入甲醇在低温下终止反应,再加入定量内标地西泮(diazepam,DZP),涡旋后高速离心,取上清液50 μl进样.结果 1′-羟基咪达唑仑(1-hydroxymidazolam,1′-OHMDZ)与内标DZP tR分别为7.02 min、10.51 min,峰形对称且分离充分(R>1.5),线性范围为15.6～780 ng·ml-1,最低定量限(lower limit of quantitation,LLOQ)为15.6 ng·ml-1,高中低浓度提取回收率为106.3%、102.5%和102.6%,待测物的日内、日间相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)小于10%.肝微粒体Km=15 μmol·L-1,Vmax=0.081 59 nM·min-1·mg-1.结论 温孵体系中的其他内源性物质不干扰测定.该方法快速、稳定、灵敏度高,适合体外DZP及其代谢产物1′-羟基咪达唑仑的测定,可用于体外CYP 3A酶活性测定或酶动力学研究.
目的 建立一種快速、準確的以咪達唑崙作為"探針藥物"評價或測定細胞色素酶(CYP3A4)酶活性的高效液相色譜(high-performance liquid chromatography,HPLC)-紫外檢測(UV detection,VWD)方法.方法 採用的色譜柱為依立特C18柱(4.6 mm×100 mm,5 μm),流速0.8 ml/min,紫外檢測波長254 nm,柱溫40 ℃.咪達唑崙(midazolam,MDZ)與大鼠肝微粒體溫孵後,加入甲醇在低溫下終止反應,再加入定量內標地西泮(diazepam,DZP),渦鏇後高速離心,取上清液50 μl進樣.結果 1′-羥基咪達唑崙(1-hydroxymidazolam,1′-OHMDZ)與內標DZP tR分彆為7.02 min、10.51 min,峰形對稱且分離充分(R>1.5),線性範圍為15.6～780 ng·ml-1,最低定量限(lower limit of quantitation,LLOQ)為15.6 ng·ml-1,高中低濃度提取迴收率為106.3%、102.5%和102.6%,待測物的日內、日間相對標準偏差(relative standard deviation,RSD)小于10%.肝微粒體Km=15 μmol·L-1,Vmax=0.081 59 nM·min-1·mg-1.結論 溫孵體繫中的其他內源性物質不榦擾測定.該方法快速、穩定、靈敏度高,適閤體外DZP及其代謝產物1′-羥基咪達唑崙的測定,可用于體外CYP 3A酶活性測定或酶動力學研究.
목적 건립일충쾌속、준학적이미체서륜작위"탐침약물"평개혹측정세포색소매(CYP3A4)매활성적고효액상색보(high-performance liquid chromatography,HPLC)-자외검측(UV detection,VWD)방법.방법 채용적색보주위의립특C18주(4.6 mm×100 mm,5 μm),류속0.8 ml/min,자외검측파장254 nm,주온40 ℃.미체서륜(midazolam,MDZ)여대서간미립체온부후,가입갑순재저온하종지반응,재가입정량내표지서반(diazepam,DZP),와선후고속리심,취상청액50 μl진양.결과 1′-간기미체서륜(1-hydroxymidazolam,1′-OHMDZ)여내표DZP tR분별위7.02 min、10.51 min,봉형대칭차분리충분(R>1.5),선성범위위15.6～780 ng·ml-1,최저정량한(lower limit of quantitation,LLOQ)위15.6 ng·ml-1,고중저농도제취회수솔위106.3%、102.5%화102.6%,대측물적일내、일간상대표준편차(relative standard deviation,RSD)소우10%.간미립체Km=15 μmol·L-1,Vmax=0.081 59 nM·min-1·mg-1.결론 온부체계중적기타내원성물질불간우측정.해방법쾌속、은정、령민도고,괄합체외DZP급기대사산물1′-간기미체서륜적측정,가용우체외CYP 3A매활성측정혹매동역학연구.
