贝类派琴虫实时荧光定量PCR检测方法的建立和应用
패류파금충실시형광정량PCR검측방법적건립화응용
Establishment and application of real time PCR method for detection of Perkinsus sp. in bivalves
  • 万方数据
    渔业科学进展 어업과학진전
    MARINE FISHERIES RESEARCH
    2009年 5期 58-63 ,共6页

    吴绍强%李海艳%林祥梅%郑腾%李西峰%刘建%梅琳%韩雪清%贾广乐

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    选择派琴虫保守的核糖体DNA ITS-2区域设计引物和TaqMan探针,通过对反应体系和反应条件进行优化,建立了实时荧光定量PCR检测派琴虫的方法.所构建方法检测质粒模板DNA的动态范围为2.6×101～2.6×107拷贝,敏感度可检测到26拷贝质粒DNA,而且与包拉米原虫、隐孢子虫等其他寄生性原虫无交叉反应,也不受贝类组织DNA的干扰.利用本研究所建立的方法对来自我国山东、福建等不同沿海海域的30份贝类样品进行检测,检出阳性样品3份.研究表明,本研究所构建的派琴虫实时荧光定量PCR检测方法具有快速、灵敏和特异等优点,可满足国内养殖场及进出口水生动物携带派琴虫的检测需要.
    선택파금충보수적핵당체DNA ITS-2구역설계인물화TaqMan탐침,통과대반응체계화반응조건진행우화,건립료실시형광정량PCR검측파금충적방법.소구건방법검측질립모판DNA적동태범위위2.6×101～2.6×107고패,민감도가검측도26고패질립DNA,이차여포랍미원충、은포자충등기타기생성원충무교차반응,야불수패류조직DNA적간우.이용본연구소건립적방법대래자아국산동、복건등불동연해해역적30빈패류양품진행검측,검출양성양품3빈.연구표명,본연구소구건적파금충실시형광정량PCR검측방법구유쾌속、령민화특이등우점,가만족국내양식장급진출구수생동물휴대파금충적검측수요.
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