分子植物育种
分子植物育種
분자식물육충
MOLECULAR PLANT BREEDING
2009年
5期
966-971
,共6页
师校欣%王英%杜国强%王燕霞%王晓蔓%裴东
師校訢%王英%杜國彊%王燕霞%王曉蔓%裴東
사교흔%왕영%두국강%왕연하%왕효만%배동
根癌农杆菌%质粒%抗生素%二次悬浮培养%稳定性
根癌農桿菌%質粒%抗生素%二次懸浮培養%穩定性
근암농간균%질립%항생소%이차현부배양%은정성
本试验对携带不同目的基因和启动子的农杆菌菌株在去掉抗生素条件下进行菌液二次悬浮时的质粒稳定性进行了研究.结果表明:GV3101菌株中的几丁质酶基因质粒与AGL1菌株中的CBF3/rd29a质粒非常稳定,未发生质粒丢失现象;其次是LBA4404菌株中的CpTI质粒,虽发生个别质粒丢失,但与对照相比没有显著差异;携带CBF3/rd29a质粒的EHA105菌株悬浮培养12 h后质粒发生明显丢失;含β-1,3葡聚糖酶基因质粒的EHA105菌株、含CBF3/CaMV 35S质粒的GV3101菌株悬浮培养10 h后质粒发生明显丢失;EHA105菌株CBF1/rd29a质粒和AGL1菌株CBF3/CaMV35S基因质粒最不稳定,分别悬浮培养6 h和4h后即发生质粒明显丢失,且随悬浮培养时间的延长,质粒丢失率显著增高.质粒丢失程度与目的基因、启动子和农杆菌菌株三要素中的单一因素没有规律性联系,而是与目的基因、启动子和农杆菌菌株的组合有关;同时,在悬浮时间为0.5～6.0 h范围内,质粒丢失主要与菌液浓度有关,而与悬浮时间关系不大;直接吸取一次悬浮液或离心后分别悬浮于细菌培养液和植物培养液等不同的悬浮培养方式下质粒稳定性没有差异.
本試驗對攜帶不同目的基因和啟動子的農桿菌菌株在去掉抗生素條件下進行菌液二次懸浮時的質粒穩定性進行瞭研究.結果錶明:GV3101菌株中的幾丁質酶基因質粒與AGL1菌株中的CBF3/rd29a質粒非常穩定,未髮生質粒丟失現象;其次是LBA4404菌株中的CpTI質粒,雖髮生箇彆質粒丟失,但與對照相比沒有顯著差異;攜帶CBF3/rd29a質粒的EHA105菌株懸浮培養12 h後質粒髮生明顯丟失;含β-1,3葡聚糖酶基因質粒的EHA105菌株、含CBF3/CaMV 35S質粒的GV3101菌株懸浮培養10 h後質粒髮生明顯丟失;EHA105菌株CBF1/rd29a質粒和AGL1菌株CBF3/CaMV35S基因質粒最不穩定,分彆懸浮培養6 h和4h後即髮生質粒明顯丟失,且隨懸浮培養時間的延長,質粒丟失率顯著增高.質粒丟失程度與目的基因、啟動子和農桿菌菌株三要素中的單一因素沒有規律性聯繫,而是與目的基因、啟動子和農桿菌菌株的組閤有關;同時,在懸浮時間為0.5～6.0 h範圍內,質粒丟失主要與菌液濃度有關,而與懸浮時間關繫不大;直接吸取一次懸浮液或離心後分彆懸浮于細菌培養液和植物培養液等不同的懸浮培養方式下質粒穩定性沒有差異.
본시험대휴대불동목적기인화계동자적농간균균주재거도항생소조건하진행균액이차현부시적질립은정성진행료연구.결과표명:GV3101균주중적궤정질매기인질립여AGL1균주중적CBF3/rd29a질립비상은정,미발생질립주실현상;기차시LBA4404균주중적CpTI질립,수발생개별질립주실,단여대조상비몰유현저차이;휴대CBF3/rd29a질립적EHA105균주현부배양12 h후질립발생명현주실;함β-1,3포취당매기인질립적EHA105균주、함CBF3/CaMV 35S질립적GV3101균주현부배양10 h후질립발생명현주실;EHA105균주CBF1/rd29a질립화AGL1균주CBF3/CaMV35S기인질립최불은정,분별현부배양6 h화4h후즉발생질립명현주실,차수현부배양시간적연장,질립주실솔현저증고.질립주실정도여목적기인、계동자화농간균균주삼요소중적단일인소몰유규률성련계,이시여목적기인、계동자화농간균균주적조합유관;동시,재현부시간위0.5～6.0 h범위내,질립주실주요여균액농도유관,이여현부시간관계불대;직접흡취일차현부액혹리심후분별현부우세균배양액화식물배양액등불동적현부배양방식하질립은정성몰유차이.
