中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2009年
11期
1482-1486
,共5页
李刚%容敏华%钟艳平%丁兰芳%覃健%廖明%萧浩%何敏
李剛%容敏華%鐘豔平%丁蘭芳%覃健%廖明%蕭浩%何敏
리강%용민화%종염평%정란방%담건%료명%소호%하민
EGCG%细胞早期凋亡%基因谱%蛋白谱%Real-time PCR%肝癌
EGCG%細胞早期凋亡%基因譜%蛋白譜%Real-time PCR%肝癌
EGCG%세포조기조망%기인보%단백보%Real-time PCR%간암
目的 探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)诱导人肝癌SMMC-7721细胞早期凋亡的变化规律,以及EGCG作用后SMMC-7721细胞基因及蛋白谱的变化.方法 通过MTT法初步筛选EGCG诱导SMMC-7721细胞凋亡的作用浓度,流式细胞Annexin V-FITC/PI法检测EGCG对SMMC-7721细胞增殖的抑制作用和早期凋亡的诱导效应;运用Affymetrix U133A 2.0人基因组表达谱芯片检测EGCG作用后SMMC-7721细胞基因表达谱的变化,以及SELDI检测EGCG作用后SMMC-7721细胞蛋白图谱的变化, Real-time PCR验证3个表达差异显著基因.结果 EGCG诱导SMMC-7721细胞早期凋亡的最佳作用剂量是218.2 μmol·L-1,早期凋亡的作用呈剂量依赖性;SMMC-7721细胞经EGCG作用后,表达差异两倍以上的基因共196个,包括上调基因132个和下调基因64个;EGCG作用后表达差异两倍以上的蛋白共43个,包括23个表达上调蛋白,20个表达下调蛋白.Real-time PCR验证DIO2、Id3基因表达与芯片结果一致.结论 EGCG有明显的诱导肝癌SMMC-7721细胞早期凋亡的作用,其诱导凋亡作用涉及多基因和多蛋白变化.
目的 探討錶沒食子兒茶素沒食子痠酯(EGCG)誘導人肝癌SMMC-7721細胞早期凋亡的變化規律,以及EGCG作用後SMMC-7721細胞基因及蛋白譜的變化.方法 通過MTT法初步篩選EGCG誘導SMMC-7721細胞凋亡的作用濃度,流式細胞Annexin V-FITC/PI法檢測EGCG對SMMC-7721細胞增殖的抑製作用和早期凋亡的誘導效應;運用Affymetrix U133A 2.0人基因組錶達譜芯片檢測EGCG作用後SMMC-7721細胞基因錶達譜的變化,以及SELDI檢測EGCG作用後SMMC-7721細胞蛋白圖譜的變化, Real-time PCR驗證3箇錶達差異顯著基因.結果 EGCG誘導SMMC-7721細胞早期凋亡的最佳作用劑量是218.2 μmol·L-1,早期凋亡的作用呈劑量依賴性;SMMC-7721細胞經EGCG作用後,錶達差異兩倍以上的基因共196箇,包括上調基因132箇和下調基因64箇;EGCG作用後錶達差異兩倍以上的蛋白共43箇,包括23箇錶達上調蛋白,20箇錶達下調蛋白.Real-time PCR驗證DIO2、Id3基因錶達與芯片結果一緻.結論 EGCG有明顯的誘導肝癌SMMC-7721細胞早期凋亡的作用,其誘導凋亡作用涉及多基因和多蛋白變化.
목적 탐토표몰식자인다소몰식자산지(EGCG)유도인간암SMMC-7721세포조기조망적변화규률,이급EGCG작용후SMMC-7721세포기인급단백보적변화.방법 통과MTT법초보사선EGCG유도SMMC-7721세포조망적작용농도,류식세포Annexin V-FITC/PI법검측EGCG대SMMC-7721세포증식적억제작용화조기조망적유도효응;운용Affymetrix U133A 2.0인기인조표체보심편검측EGCG작용후SMMC-7721세포기인표체보적변화,이급SELDI검측EGCG작용후SMMC-7721세포단백도보적변화, Real-time PCR험증3개표체차이현저기인.결과 EGCG유도SMMC-7721세포조기조망적최가작용제량시218.2 μmol·L-1,조기조망적작용정제량의뢰성;SMMC-7721세포경EGCG작용후,표체차이량배이상적기인공196개,포괄상조기인132개화하조기인64개;EGCG작용후표체차이량배이상적단백공43개,포괄23개표체상조단백,20개표체하조단백.Real-time PCR험증DIO2、Id3기인표체여심편결과일치.결론 EGCG유명현적유도간암SMMC-7721세포조기조망적작용,기유도조망작용섭급다기인화다단백변화.
