中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2009年
11期
1415-1420
,共6页
袁国强%王玲玲%杨海涛%吴士珍%贾振华%李娟%吴以岭
袁國彊%王玲玲%楊海濤%吳士珍%賈振華%李娟%吳以嶺
원국강%왕령령%양해도%오사진%가진화%리연%오이령
肿瘤坏死因子-α%p38 MAPK%内皮素-1%内皮型一氧化氮合酶%信号通路%人脐静脉内皮细胞%通心络
腫瘤壞死因子-α%p38 MAPK%內皮素-1%內皮型一氧化氮閤酶%信號通路%人臍靜脈內皮細胞%通心絡
종류배사인자-α%p38 MAPK%내피소-1%내피형일양화담합매%신호통로%인제정맥내피세포%통심락
目的 观察p38 MAPK信号通路在肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)表达内皮素-1(ET-1)与内皮型一氧化氮合酶(eNOS)中的作用及通心络干预影响.方法 分别采用放免法及ELISA法测定不同浓度TNF-α(0、2.5、5、10、15、20 μg·L-1)在不同时间点(0、1、2、4、8、12、24 h)干预后HUVEC培养上清液中ET-1和eNOS含量;分别采用Western blot 和Real time RT-PCR方法检测TNF-α干预24 h后HUVEC中ET-1、eNOS蛋白及mRNA表达;采用Western blot方法检测TNF-α干预10 min、30 min、60 min后HUVEC磷酸化p38 MAPK蛋白表达.结果 不同浓度TNF-α随时间延长均明显增加HUVEC培养上清液中ET-1含量,降低eNOS含量;TNF-α升高细胞中ET-1蛋白及mRNA水平、降低eNOS 蛋白及mRNA水平、在各时间点均可升高细胞p-p38 MAPK蛋白表达.通心络可降低TNF-α诱导的HUVEC培养上清ET-1含量、降低细胞中ET-1蛋白及mRNA的异常升高;增加HUVEC培养上清中eNOS的表达、增加细胞中eNOS蛋白及mRNA的表达;明显抑制TNF-α诱导的细胞p-p38 MAPK表达.结论 p38 MAPK信号通路参与了TNF-α诱导HUECV细胞分泌ET-1和eNOS,通心络对内皮细胞保护作用机制与抑制该通路有关.
目的 觀察p38 MAPK信號通路在腫瘤壞死因子-α(TNF-α)誘導人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)錶達內皮素-1(ET-1)與內皮型一氧化氮閤酶(eNOS)中的作用及通心絡榦預影響.方法 分彆採用放免法及ELISA法測定不同濃度TNF-α(0、2.5、5、10、15、20 μg·L-1)在不同時間點(0、1、2、4、8、12、24 h)榦預後HUVEC培養上清液中ET-1和eNOS含量;分彆採用Western blot 和Real time RT-PCR方法檢測TNF-α榦預24 h後HUVEC中ET-1、eNOS蛋白及mRNA錶達;採用Western blot方法檢測TNF-α榦預10 min、30 min、60 min後HUVEC燐痠化p38 MAPK蛋白錶達.結果 不同濃度TNF-α隨時間延長均明顯增加HUVEC培養上清液中ET-1含量,降低eNOS含量;TNF-α升高細胞中ET-1蛋白及mRNA水平、降低eNOS 蛋白及mRNA水平、在各時間點均可升高細胞p-p38 MAPK蛋白錶達.通心絡可降低TNF-α誘導的HUVEC培養上清ET-1含量、降低細胞中ET-1蛋白及mRNA的異常升高;增加HUVEC培養上清中eNOS的錶達、增加細胞中eNOS蛋白及mRNA的錶達;明顯抑製TNF-α誘導的細胞p-p38 MAPK錶達.結論 p38 MAPK信號通路參與瞭TNF-α誘導HUECV細胞分泌ET-1和eNOS,通心絡對內皮細胞保護作用機製與抑製該通路有關.
목적 관찰p38 MAPK신호통로재종류배사인자-α(TNF-α)유도인제정맥내피세포(HUVEC)표체내피소-1(ET-1)여내피형일양화담합매(eNOS)중적작용급통심락간예영향.방법 분별채용방면법급ELISA법측정불동농도TNF-α(0、2.5、5、10、15、20 μg·L-1)재불동시간점(0、1、2、4、8、12、24 h)간예후HUVEC배양상청액중ET-1화eNOS함량;분별채용Western blot 화Real time RT-PCR방법검측TNF-α간예24 h후HUVEC중ET-1、eNOS단백급mRNA표체;채용Western blot방법검측TNF-α간예10 min、30 min、60 min후HUVEC린산화p38 MAPK단백표체.결과 불동농도TNF-α수시간연장균명현증가HUVEC배양상청액중ET-1함량,강저eNOS함량;TNF-α승고세포중ET-1단백급mRNA수평、강저eNOS 단백급mRNA수평、재각시간점균가승고세포p-p38 MAPK단백표체.통심락가강저TNF-α유도적HUVEC배양상청ET-1함량、강저세포중ET-1단백급mRNA적이상승고;증가HUVEC배양상청중eNOS적표체、증가세포중eNOS단백급mRNA적표체;명현억제TNF-α유도적세포p-p38 MAPK표체.결론 p38 MAPK신호통로삼여료TNF-α유도HUECV세포분비ET-1화eNOS,통심락대내피세포보호작용궤제여억제해통로유관.
