肿瘤
腫瘤
종류
TUMOR
2009年
11期
1059-1064
,共6页
马爱辉%何爱丽%葛超%刘永忠
馬愛輝%何愛麗%葛超%劉永忠
마애휘%하애려%갈초%류영충
肝肿瘤%动物实验%钙黏附素%胚胎肝前体细胞
肝腫瘤%動物實驗%鈣黏附素%胚胎肝前體細胞
간종류%동물실험%개점부소%배태간전체세포
目的:观察组成性活化Akt1(myr-Akt1)导入的p53-/-鼠胚胎肝前体细胞(fetal hepatic progenitor cells, FHPCs)体外培养的特点和小鼠体内肿瘤模型的建立.方法:利用磁性细胞分选系统(magnetic cell-sorting system,MACS)分离上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)阳性的p53-/-小鼠FHPCs,经细胞体外培养和反转录病毒导入myr-Akt1后,接种到C57BL/6小鼠的脾脏.应用RT-PCR和免疫组织化学法分析肝细胞分化和生长相关基因mRNA和蛋白的表达.结果:导入myr-Akt1后可明显提高E-cadherin阳性p53-/-小鼠FHPCs的体外生长和克隆形成能力,并可导致p16Ink4a和p19Arf mRNA表达水平下降;将该细胞接种到小鼠脾脏后可形成肿瘤,肿瘤细胞内GSK3β呈磷酸化,β-catenin呈一定水平表达.结论:成功建立了经Akt1修饰的p53-/-鼠FHPCs体内肿瘤模型,为探讨肝癌发生的分子机制和对相关抗癌药物的研究提供了平台.
目的:觀察組成性活化Akt1(myr-Akt1)導入的p53-/-鼠胚胎肝前體細胞(fetal hepatic progenitor cells, FHPCs)體外培養的特點和小鼠體內腫瘤模型的建立.方法:利用磁性細胞分選繫統(magnetic cell-sorting system,MACS)分離上皮細胞鈣黏蛋白(E-cadherin)暘性的p53-/-小鼠FHPCs,經細胞體外培養和反轉錄病毒導入myr-Akt1後,接種到C57BL/6小鼠的脾髒.應用RT-PCR和免疫組織化學法分析肝細胞分化和生長相關基因mRNA和蛋白的錶達.結果:導入myr-Akt1後可明顯提高E-cadherin暘性p53-/-小鼠FHPCs的體外生長和剋隆形成能力,併可導緻p16Ink4a和p19Arf mRNA錶達水平下降;將該細胞接種到小鼠脾髒後可形成腫瘤,腫瘤細胞內GSK3β呈燐痠化,β-catenin呈一定水平錶達.結論:成功建立瞭經Akt1脩飾的p53-/-鼠FHPCs體內腫瘤模型,為探討肝癌髮生的分子機製和對相關抗癌藥物的研究提供瞭平檯.
목적:관찰조성성활화Akt1(myr-Akt1)도입적p53-/-서배태간전체세포(fetal hepatic progenitor cells, FHPCs)체외배양적특점화소서체내종류모형적건립.방법:이용자성세포분선계통(magnetic cell-sorting system,MACS)분리상피세포개점단백(E-cadherin)양성적p53-/-소서FHPCs,경세포체외배양화반전록병독도입myr-Akt1후,접충도C57BL/6소서적비장.응용RT-PCR화면역조직화학법분석간세포분화화생장상관기인mRNA화단백적표체.결과:도입myr-Akt1후가명현제고E-cadherin양성p53-/-소서FHPCs적체외생장화극륭형성능력,병가도치p16Ink4a화p19Arf mRNA표체수평하강;장해세포접충도소서비장후가형성종류,종류세포내GSK3β정린산화,β-catenin정일정수평표체.결론:성공건립료경Akt1수식적p53-/-서FHPCs체내종류모형,위탐토간암발생적분자궤제화대상관항암약물적연구제공료평태.
