肿瘤
腫瘤
종류
TUMOR
2009年
11期
1040-1044
,共5页
胰腺肿瘤%细胞凋亡%DNA,反义%吉西他滨%凋亡调节蛋白质类%p53正向凋亡调控因子
胰腺腫瘤%細胞凋亡%DNA,反義%吉西他濱%凋亡調節蛋白質類%p53正嚮凋亡調控因子
이선종류%세포조망%DNA,반의%길서타빈%조망조절단백질류%p53정향조망조공인자
目的:研究吉西他滨对人胰腺癌AsPC-1细胞体外生长的作用机制.方法:用脂质体转染法将含有p53正向凋亡调控因子(p53 upregulated modulator of apoptosis,PUMA)反义核酸的真核表达载体pcDNA3.1-PUMAAS和空载体pcDNA3.1导入AsPC-1细胞,G418筛选阳性细胞,获得稳定转染的阳性克隆.将转染载体的AsPC-1阳性克隆细胞和未转染载体的AsPC-1细胞分别暴露于浓度为1、5、10和15 μmol/L的吉西他滨溶液中作用72 h.RT-PCR和Western印迹法检测不同组细胞经吉西他滨作用72 h后的PUMA表达水平,MTT检测细胞生长抑制情况, FCM、Hoechst 33258荧光染色和TUNEL法检测细胞凋亡情况.结果:吉西他滨促进AsPC-1细胞凋亡,抑制细胞生长,并有明显的剂量依赖性,在细胞凋亡的同时伴有PUMA表达的上调;当细胞转染PUMA反义核酸抑制PUMA表达后,受吉西他滨作用的细胞中PUMA蛋白表达明显降低,同时伴有细胞凋亡的抑制及细胞增殖明显增加.结论:吉西他滨促进体外AsPC-1细胞凋亡,并抑制细胞生长,其诱导细胞凋亡与上调PUMA表达有关.
目的:研究吉西他濱對人胰腺癌AsPC-1細胞體外生長的作用機製.方法:用脂質體轉染法將含有p53正嚮凋亡調控因子(p53 upregulated modulator of apoptosis,PUMA)反義覈痠的真覈錶達載體pcDNA3.1-PUMAAS和空載體pcDNA3.1導入AsPC-1細胞,G418篩選暘性細胞,穫得穩定轉染的暘性剋隆.將轉染載體的AsPC-1暘性剋隆細胞和未轉染載體的AsPC-1細胞分彆暴露于濃度為1、5、10和15 μmol/L的吉西他濱溶液中作用72 h.RT-PCR和Western印跡法檢測不同組細胞經吉西他濱作用72 h後的PUMA錶達水平,MTT檢測細胞生長抑製情況, FCM、Hoechst 33258熒光染色和TUNEL法檢測細胞凋亡情況.結果:吉西他濱促進AsPC-1細胞凋亡,抑製細胞生長,併有明顯的劑量依賴性,在細胞凋亡的同時伴有PUMA錶達的上調;噹細胞轉染PUMA反義覈痠抑製PUMA錶達後,受吉西他濱作用的細胞中PUMA蛋白錶達明顯降低,同時伴有細胞凋亡的抑製及細胞增殖明顯增加.結論:吉西他濱促進體外AsPC-1細胞凋亡,併抑製細胞生長,其誘導細胞凋亡與上調PUMA錶達有關.
목적:연구길서타빈대인이선암AsPC-1세포체외생장적작용궤제.방법:용지질체전염법장함유p53정향조망조공인자(p53 upregulated modulator of apoptosis,PUMA)반의핵산적진핵표체재체pcDNA3.1-PUMAAS화공재체pcDNA3.1도입AsPC-1세포,G418사선양성세포,획득은정전염적양성극륭.장전염재체적AsPC-1양성극륭세포화미전염재체적AsPC-1세포분별폭로우농도위1、5、10화15 μmol/L적길서타빈용액중작용72 h.RT-PCR화Western인적법검측불동조세포경길서타빈작용72 h후적PUMA표체수평,MTT검측세포생장억제정황, FCM、Hoechst 33258형광염색화TUNEL법검측세포조망정황.결과:길서타빈촉진AsPC-1세포조망,억제세포생장,병유명현적제량의뢰성,재세포조망적동시반유PUMA표체적상조;당세포전염PUMA반의핵산억제PUMA표체후,수길서타빈작용적세포중PUMA단백표체명현강저,동시반유세포조망적억제급세포증식명현증가.결론:길서타빈촉진체외AsPC-1세포조망,병억제세포생장,기유도세포조망여상조PUMA표체유관.
