中国人兽共患病学报
中國人獸共患病學報
중국인수공환병학보
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2009年
11期
1085-1088
,共4页
宫晓炜%景涛%王国治%李恪梅%王秉翔%傅林锋
宮曉煒%景濤%王國治%李恪梅%王秉翔%傅林鋒
궁효위%경도%왕국치%리각매%왕병상%부림봉
布鲁氏菌%BP26重组蛋白%抗原性
佈魯氏菌%BP26重組蛋白%抗原性
포로씨균%BP26중조단백%항원성
目的 获得布鲁氏菌感染血清学诊断优势抗原BP26重组蛋白.方法 应用PCR技术从布鲁氏菌减毒株(104M)中扩增出bp26目的 基因片段,将其克隆于表达载体PET30a中,并转化入大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达,用亲和层析纯化BP26重组蛋白,然后分别用Western-blot,间接ELISA检测其抗原性.结果 DNA测序及酶切鉴定证实PET-30a/bp26原核表达载体构建成功,并在大肠杆菌中高效表达,免疫印迹和间接ELISA实验证明BP26重组蛋白可与布鲁氏菌阳性血清产生特异性结合.结论 成功获得了布鲁氏菌中序列全长为696bp,编码232个氨基酸的BP26蛋白,通过血清学反应证实,该蛋白为人和动物布鲁氏菌病临床诊断试剂盒的研发奠定了基础.
目的 穫得佈魯氏菌感染血清學診斷優勢抗原BP26重組蛋白.方法 應用PCR技術從佈魯氏菌減毒株(104M)中擴增齣bp26目的 基因片段,將其剋隆于錶達載體PET30a中,併轉化入大腸桿菌BL21(DE3)中,IPTG誘導錶達,用親和層析純化BP26重組蛋白,然後分彆用Western-blot,間接ELISA檢測其抗原性.結果 DNA測序及酶切鑒定證實PET-30a/bp26原覈錶達載體構建成功,併在大腸桿菌中高效錶達,免疫印跡和間接ELISA實驗證明BP26重組蛋白可與佈魯氏菌暘性血清產生特異性結閤.結論 成功穫得瞭佈魯氏菌中序列全長為696bp,編碼232箇氨基痠的BP26蛋白,通過血清學反應證實,該蛋白為人和動物佈魯氏菌病臨床診斷試劑盒的研髮奠定瞭基礎.
목적 획득포로씨균감염혈청학진단우세항원BP26중조단백.방법 응용PCR기술종포로씨균감독주(104M)중확증출bp26목적 기인편단,장기극륭우표체재체PET30a중,병전화입대장간균BL21(DE3)중,IPTG유도표체,용친화층석순화BP26중조단백,연후분별용Western-blot,간접ELISA검측기항원성.결과 DNA측서급매절감정증실PET-30a/bp26원핵표체재체구건성공,병재대장간균중고효표체,면역인적화간접ELISA실험증명BP26중조단백가여포로씨균양성혈청산생특이성결합.결론 성공획득료포로씨균중서렬전장위696bp,편마232개안기산적BP26단백,통과혈청학반응증실,해단백위인화동물포로씨균병림상진단시제합적연발전정료기출.
