天津医药
天津醫藥
천진의약
TIANJIN MEDICAL JOURNAL
2009年
11期
941-943,后插二
,共4页
刘丹%何明%易波%阙爱玲%徐江晶%张吉翔
劉丹%何明%易波%闕愛玲%徐江晶%張吉翔
류단%하명%역파%궐애령%서강정%장길상
肌细胞%心脏%创伤和损伤%细胞色素c类%半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3%细胞凋亡%缺氧
肌細胞%心髒%創傷和損傷%細胞色素c類%半胱氨痠天鼕氨痠蛋白酶3%細胞凋亡%缺氧
기세포%심장%창상화손상%세포색소c류%반광안산천동안산단백매3%세포조망%결양
目的:探讨原癌基因Pim-3对抗心肌急性损伤的作用是否与线粒体信号转导途径介导的细胞色素C(Cyt C)的释放有关.方法:采用大鼠乳鼠心肌细胞,随机分为4组,对照组;缺氧复氧(A/R)组,建立A/R损伤模型;pcDNA3.1+A/R组,将pcDNA3.1转染入心肌细胞,24 h后进行A/R损伤;pcDNA3.1/Pim-3+A/R组,将Pim-3重组质粒(pcDNA3.1/Pim-3)转染入心肌细胞,24 h后进行A/R损伤.实验结束后,检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH) 活性,四唑盐(MTT)比色试验测定细胞存活率,TUNEL法检测细胞凋亡,蛋白印迹检测Pim-3 蛋白表达水平,线粒体、胞浆Cyt C动态变化和caspase-3活性.结果:与对照组比较,A/R组细胞存活率明显下降,LDH值和凋亡指数明显升高,差异有统计学意义(P ＜ 0.01);与A/R组比较,pcDNA3.1/Pim-3+A/R组细胞存活率明显升高,LDH值和凋亡指数明显下降,并且Cyt C由线粒体向胞浆的释放明显被抑制,同时caspase-3活性也下降,差异有统计学意义(P ＜ 0.01).结论:Pim-3对抗心肌急性损伤的机制是通过抑制Cyt C易位释放入胞浆激活caspase-3而致.
目的:探討原癌基因Pim-3對抗心肌急性損傷的作用是否與線粒體信號轉導途徑介導的細胞色素C(Cyt C)的釋放有關.方法:採用大鼠乳鼠心肌細胞,隨機分為4組,對照組;缺氧複氧(A/R)組,建立A/R損傷模型;pcDNA3.1+A/R組,將pcDNA3.1轉染入心肌細胞,24 h後進行A/R損傷;pcDNA3.1/Pim-3+A/R組,將Pim-3重組質粒(pcDNA3.1/Pim-3)轉染入心肌細胞,24 h後進行A/R損傷.實驗結束後,檢測培養液中乳痠脫氫酶(LDH) 活性,四唑鹽(MTT)比色試驗測定細胞存活率,TUNEL法檢測細胞凋亡,蛋白印跡檢測Pim-3 蛋白錶達水平,線粒體、胞漿Cyt C動態變化和caspase-3活性.結果:與對照組比較,A/R組細胞存活率明顯下降,LDH值和凋亡指數明顯升高,差異有統計學意義(P ＜ 0.01);與A/R組比較,pcDNA3.1/Pim-3+A/R組細胞存活率明顯升高,LDH值和凋亡指數明顯下降,併且Cyt C由線粒體嚮胞漿的釋放明顯被抑製,同時caspase-3活性也下降,差異有統計學意義(P ＜ 0.01).結論:Pim-3對抗心肌急性損傷的機製是通過抑製Cyt C易位釋放入胞漿激活caspase-3而緻.
목적:탐토원암기인Pim-3대항심기급성손상적작용시부여선립체신호전도도경개도적세포색소C(Cyt C)적석방유관.방법:채용대서유서심기세포,수궤분위4조,대조조;결양복양(A/R)조,건립A/R손상모형;pcDNA3.1+A/R조,장pcDNA3.1전염입심기세포,24 h후진행A/R손상;pcDNA3.1/Pim-3+A/R조,장Pim-3중조질립(pcDNA3.1/Pim-3)전염입심기세포,24 h후진행A/R손상.실험결속후,검측배양액중유산탈경매(LDH) 활성,사서염(MTT)비색시험측정세포존활솔,TUNEL법검측세포조망,단백인적검측Pim-3 단백표체수평,선립체、포장Cyt C동태변화화caspase-3활성.결과:여대조조비교,A/R조세포존활솔명현하강,LDH치화조망지수명현승고,차이유통계학의의(P ＜ 0.01);여A/R조비교,pcDNA3.1/Pim-3+A/R조세포존활솔명현승고,LDH치화조망지수명현하강,병차Cyt C유선립체향포장적석방명현피억제,동시caspase-3활성야하강,차이유통계학의의(P ＜ 0.01).결론:Pim-3대항심기급성손상적궤제시통과억제Cyt C역위석방입포장격활caspase-3이치.
