山西医药杂志
山西醫藥雜誌
산서의약잡지
SHANXI MEDICAL JOURNAL
2012年
21期
1071-1074
,共4页
于志娟%马晓欣%张茹%王翠翠
于誌娟%馬曉訢%張茹%王翠翠
우지연%마효흔%장여%왕취취
子宫内膜肿瘤%受体,表皮生长因子%1-磷脂酰肌醇3-激酶%雌激素%环氧化酶
子宮內膜腫瘤%受體,錶皮生長因子%1-燐脂酰肌醇3-激酶%雌激素%環氧化酶
자궁내막종류%수체,표피생장인자%1-린지선기순3-격매%자격소%배양화매
目的 研究抑制磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路对表皮生长因子受体2(HER-2/neu)诱导的雌激素依赖性子宫内膜癌细胞增殖的拮抗作用.方法 ①表皮生长因子(EGF)处理Ishikawa细胞株及转染HER-2/neu的Ishikawa细胞株,蛋白印迹法检测转染细胞前后总Akt(t-Akt)及磷酸化Akt(p-Akt)蛋白、环氧化酶(COX)-2蛋白的表达.酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测细胞培养上清液中雌二醇(E2)的含量.②用PI3K/Akt的抑制剂LY294002抑制信号通路,以不同时间(浓度为20 μmol/L时,分别作用10,20,40和60 min) 和不同浓度(5,10,20和40 μmol/L)作用30 min后,再次检测COX-2的表达水平,ELISA检测E2水平.结果 HER-2/neu可引起子宫内膜癌细胞Akt活化,经EGF刺激后p-Akt/t-Akt比值、COX-2及细胞上清液中E2的表达量在转染组显著高于未转染组(P<0.05).应用抑制剂抑制PI3K/Akt通路后,转染HER-2/neu的Ishikawa细胞株中COX-2的表达水平低于正常的Ishikawa细胞株,同时细胞上清液中肿瘤E2的含量于转染HER-2/neu的Ishikawa细胞株明显低于正常Ishikawa细胞株(P＜0.05);随药物浓度的增加及作用时间的延长,2组细胞COX-2及E2的表达均逐渐减少,且抑制作用与浓度及作用时间呈依赖关系.结论 HER-2/neu可能通过PI3K/Akt通路来诱导COX-2的转录,进而导致雌激素的分泌增多,使子宫内膜癌细胞无限生长.
目的 研究抑製燐脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信號通路對錶皮生長因子受體2(HER-2/neu)誘導的雌激素依賴性子宮內膜癌細胞增殖的拮抗作用.方法 ①錶皮生長因子(EGF)處理Ishikawa細胞株及轉染HER-2/neu的Ishikawa細胞株,蛋白印跡法檢測轉染細胞前後總Akt(t-Akt)及燐痠化Akt(p-Akt)蛋白、環氧化酶(COX)-2蛋白的錶達.酶聯免疫吸附試驗(ELISA)方法檢測細胞培養上清液中雌二醇(E2)的含量.②用PI3K/Akt的抑製劑LY294002抑製信號通路,以不同時間(濃度為20 μmol/L時,分彆作用10,20,40和60 min) 和不同濃度(5,10,20和40 μmol/L)作用30 min後,再次檢測COX-2的錶達水平,ELISA檢測E2水平.結果 HER-2/neu可引起子宮內膜癌細胞Akt活化,經EGF刺激後p-Akt/t-Akt比值、COX-2及細胞上清液中E2的錶達量在轉染組顯著高于未轉染組(P<0.05).應用抑製劑抑製PI3K/Akt通路後,轉染HER-2/neu的Ishikawa細胞株中COX-2的錶達水平低于正常的Ishikawa細胞株,同時細胞上清液中腫瘤E2的含量于轉染HER-2/neu的Ishikawa細胞株明顯低于正常Ishikawa細胞株(P＜0.05);隨藥物濃度的增加及作用時間的延長,2組細胞COX-2及E2的錶達均逐漸減少,且抑製作用與濃度及作用時間呈依賴關繫.結論 HER-2/neu可能通過PI3K/Akt通路來誘導COX-2的轉錄,進而導緻雌激素的分泌增多,使子宮內膜癌細胞無限生長.
목적 연구억제린지선기순3격매(PI3K)/단백격매B(Akt)신호통로대표피생장인자수체2(HER-2/neu)유도적자격소의뢰성자궁내막암세포증식적길항작용.방법 ①표피생장인자(EGF)처리Ishikawa세포주급전염HER-2/neu적Ishikawa세포주,단백인적법검측전염세포전후총Akt(t-Akt)급린산화Akt(p-Akt)단백、배양화매(COX)-2단백적표체.매련면역흡부시험(ELISA)방법검측세포배양상청액중자이순(E2)적함량.②용PI3K/Akt적억제제LY294002억제신호통로,이불동시간(농도위20 μmol/L시,분별작용10,20,40화60 min) 화불동농도(5,10,20화40 μmol/L)작용30 min후,재차검측COX-2적표체수평,ELISA검측E2수평.결과 HER-2/neu가인기자궁내막암세포Akt활화,경EGF자격후p-Akt/t-Akt비치、COX-2급세포상청액중E2적표체량재전염조현저고우미전염조(P<0.05).응용억제제억제PI3K/Akt통로후,전염HER-2/neu적Ishikawa세포주중COX-2적표체수평저우정상적Ishikawa세포주,동시세포상청액중종류E2적함량우전염HER-2/neu적Ishikawa세포주명현저우정상Ishikawa세포주(P＜0.05);수약물농도적증가급작용시간적연장,2조세포COX-2급E2적표체균축점감소,차억제작용여농도급작용시간정의뢰관계.결론 HER-2/neu가능통과PI3K/Akt통로래유도COX-2적전록,진이도치자격소적분비증다,사자궁내막암세포무한생장.
