中国修复重建外科杂志
中國脩複重建外科雜誌
중국수복중건외과잡지
CHINESE JOURNAL OF REPARATIVE AND RECONSTRUCTIVE SURGERY
2008年
8期
993-997
,共5页
黄文鹏%叶启发%黄祖发%杨定华%彭民浩
黃文鵬%葉啟髮%黃祖髮%楊定華%彭民浩
황문붕%협계발%황조발%양정화%팽민호
热休克蛋白60%皮肤移植%免疫耐受%小鼠
熱休剋蛋白60%皮膚移植%免疫耐受%小鼠
열휴극단백60%피부이식%면역내수%소서
目的 探讨热休克蛋白60(heat shock protein 60,HSP60)对小鼠移植皮片成活的影响及其机制.方法 选用60只C57BL/6(H-2b)小鼠为受体,45只BALB/C(H-2d)小鼠、15只CBA/N(H-2k)为供体,均为8～12周龄近交系雌性小鼠.受体小鼠剪下1 cm×1 cm全层皮肤,干纱布清创,即为植床;随机分为4组,每组15只.A组:无菌取供体BALB/C(H-2d)小鼠背部1 cm×1 cm全层皮片,刮去皮下组织后移植至受体小鼠背部;B组:受体小鼠背部皮下注射0.1 mL不完全弗氏佐剂(imcompleted Freund's adjuvant,IFA),2周后行BALB/C(H-2d)小鼠皮肤移植;C组:受体小鼠背部皮下注射经0.1 mLIFA乳化后的50μg HSP60,2周后行BALB/C(H-2d)小鼠皮肤移植;D组:受体小鼠背部皮下注射经0.1 mL IFA乳化后的50 μg HSP60,2周后行CBA/N(H-2k)小鼠皮肤移植.B、C、D组供体皮肤移植方法同A组.术后观察移植皮片成活时间;移植术后7、25 d行单向混合淋巴细胞反应及混合淋巴细胞培养上清液细胞因子检测;术后7d行迟发型超敏反应测定.结果 A、B、C、D组移植皮片成活时间分别为(12.4±0.5)、(11.6±0.8)、(29.3±2.6)及(27.6±2.1)d;A、B组与C、D组比较,差异有统计学意义(P＜0.05),A、B组间及C、D组间比较,差异无统计学意义(P＞0.05).皮肤移植术后7 d,A、B、C、D组混合淋巴细胞反应每分钟放射脉冲数(counts of per minute impulse,cmp)值分别为12 836±1 357、11 876±1 265、6 581±573及6 843±612;A、B组与C、D组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);A、B组间及C、D组间比较差异无统计学意义(P＞0.05);术后25 d,各组cpm值分别为13 286±498、12 960±376、11 936±1 265及12 374±1 269,各组间差异无统计学意义(P＞0.05).皮肤移植术后7 d,C、D组混合淋巴细胞培养上清液IL-10高于A、B组,IL-2、干扰素γ(interferon γ,IFN-γ)低于A、B组(P＜0.05),A、B组间及C、D组间差异均无统计学意义(P＞0.05);术后25 d,各组IL-2、IL-10及IFN-γ差异无统计学意义(P＞0.05).皮肤移植术后7 d,A、B、C、D组受体小鼠对供体小鼠脾细胞的迟发型超敏反应为(0.84±0.09)、(0.81±0.07)、(0.43±0.05)及(0.46±0.03)mm;A、B组与C、D组比较,差异有统计学意义(P＜0.05),A、B组间及C、D组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 HSP60对免疫耐受的诱导和维持有一定作用.
目的 探討熱休剋蛋白60(heat shock protein 60,HSP60)對小鼠移植皮片成活的影響及其機製.方法 選用60隻C57BL/6(H-2b)小鼠為受體,45隻BALB/C(H-2d)小鼠、15隻CBA/N(H-2k)為供體,均為8～12週齡近交繫雌性小鼠.受體小鼠剪下1 cm×1 cm全層皮膚,榦紗佈清創,即為植床;隨機分為4組,每組15隻.A組:無菌取供體BALB/C(H-2d)小鼠揹部1 cm×1 cm全層皮片,颳去皮下組織後移植至受體小鼠揹部;B組:受體小鼠揹部皮下註射0.1 mL不完全弗氏佐劑(imcompleted Freund's adjuvant,IFA),2週後行BALB/C(H-2d)小鼠皮膚移植;C組:受體小鼠揹部皮下註射經0.1 mLIFA乳化後的50μg HSP60,2週後行BALB/C(H-2d)小鼠皮膚移植;D組:受體小鼠揹部皮下註射經0.1 mL IFA乳化後的50 μg HSP60,2週後行CBA/N(H-2k)小鼠皮膚移植.B、C、D組供體皮膚移植方法同A組.術後觀察移植皮片成活時間;移植術後7、25 d行單嚮混閤淋巴細胞反應及混閤淋巴細胞培養上清液細胞因子檢測;術後7d行遲髮型超敏反應測定.結果 A、B、C、D組移植皮片成活時間分彆為(12.4±0.5)、(11.6±0.8)、(29.3±2.6)及(27.6±2.1)d;A、B組與C、D組比較,差異有統計學意義(P＜0.05),A、B組間及C、D組間比較,差異無統計學意義(P＞0.05).皮膚移植術後7 d,A、B、C、D組混閤淋巴細胞反應每分鐘放射脈遲數(counts of per minute impulse,cmp)值分彆為12 836±1 357、11 876±1 265、6 581±573及6 843±612;A、B組與C、D組比較,差異有統計學意義(P＜0.05);A、B組間及C、D組間比較差異無統計學意義(P＞0.05);術後25 d,各組cpm值分彆為13 286±498、12 960±376、11 936±1 265及12 374±1 269,各組間差異無統計學意義(P＞0.05).皮膚移植術後7 d,C、D組混閤淋巴細胞培養上清液IL-10高于A、B組,IL-2、榦擾素γ(interferon γ,IFN-γ)低于A、B組(P＜0.05),A、B組間及C、D組間差異均無統計學意義(P＞0.05);術後25 d,各組IL-2、IL-10及IFN-γ差異無統計學意義(P＞0.05).皮膚移植術後7 d,A、B、C、D組受體小鼠對供體小鼠脾細胞的遲髮型超敏反應為(0.84±0.09)、(0.81±0.07)、(0.43±0.05)及(0.46±0.03)mm;A、B組與C、D組比較,差異有統計學意義(P＜0.05),A、B組間及C、D組間差異無統計學意義(P＞0.05).結論 HSP60對免疫耐受的誘導和維持有一定作用.
목적 탐토열휴극단백60(heat shock protein 60,HSP60)대소서이식피편성활적영향급기궤제.방법 선용60지C57BL/6(H-2b)소서위수체,45지BALB/C(H-2d)소서、15지CBA/N(H-2k)위공체,균위8～12주령근교계자성소서.수체소서전하1 cm×1 cm전층피부,간사포청창,즉위식상;수궤분위4조,매조15지.A조:무균취공체BALB/C(H-2d)소서배부1 cm×1 cm전층피편,괄거피하조직후이식지수체소서배부;B조:수체소서배부피하주사0.1 mL불완전불씨좌제(imcompleted Freund's adjuvant,IFA),2주후행BALB/C(H-2d)소서피부이식;C조:수체소서배부피하주사경0.1 mLIFA유화후적50μg HSP60,2주후행BALB/C(H-2d)소서피부이식;D조:수체소서배부피하주사경0.1 mL IFA유화후적50 μg HSP60,2주후행CBA/N(H-2k)소서피부이식.B、C、D조공체피부이식방법동A조.술후관찰이식피편성활시간;이식술후7、25 d행단향혼합림파세포반응급혼합림파세포배양상청액세포인자검측;술후7d행지발형초민반응측정.결과 A、B、C、D조이식피편성활시간분별위(12.4±0.5)、(11.6±0.8)、(29.3±2.6)급(27.6±2.1)d;A、B조여C、D조비교,차이유통계학의의(P＜0.05),A、B조간급C、D조간비교,차이무통계학의의(P＞0.05).피부이식술후7 d,A、B、C、D조혼합림파세포반응매분종방사맥충수(counts of per minute impulse,cmp)치분별위12 836±1 357、11 876±1 265、6 581±573급6 843±612;A、B조여C、D조비교,차이유통계학의의(P＜0.05);A、B조간급C、D조간비교차이무통계학의의(P＞0.05);술후25 d,각조cpm치분별위13 286±498、12 960±376、11 936±1 265급12 374±1 269,각조간차이무통계학의의(P＞0.05).피부이식술후7 d,C、D조혼합림파세포배양상청액IL-10고우A、B조,IL-2、간우소γ(interferon γ,IFN-γ)저우A、B조(P＜0.05),A、B조간급C、D조간차이균무통계학의의(P＞0.05);술후25 d,각조IL-2、IL-10급IFN-γ차이무통계학의의(P＞0.05).피부이식술후7 d,A、B、C、D조수체소서대공체소서비세포적지발형초민반응위(0.84±0.09)、(0.81±0.07)、(0.43±0.05)급(0.46±0.03)mm;A、B조여C、D조비교,차이유통계학의의(P＜0.05),A、B조간급C、D조간차이무통계학의의(P＞0.05).결론 HSP60대면역내수적유도화유지유일정작용.
