CAJ | 학술논문

探讨CPUY013在体内外对人胃腺癌BGC823细胞的抗肿瘤活性及其机制.采用MTT法、克隆原形成法检测CPUY013对BGC823细胞增殖的抑制作用;体外实验以pBR322 DNA为底物,依据质粒的松弛和超螺旋形式在琼脂糖电泳上泳动度对药物抑制解旋的作用进行定性分析.用AO/EB荧光染色技术、DNA凝胶电泳及JC-1线粒体膜电位检测试剂盒检测细胞凋亡.口服给药CPUY013后观察其对裸鼠移植瘤的生长抑制作用;用流式细胞术观察CPUY013对BGC823细胞周期的影响;采用Western blotting分别检测CPUY013处理后的BGC823细胞中Topo Ⅰ及凋亡相关蛋白表达的改变.结果表明,CPUY013呈明显的剂量依赖性抑制BGC823细胞的增殖.随着剂量的增加,CPUY013对Topo Ⅰ松弛活性的抑制趋势增强.100 μmol·L-1 CPUY013和拓扑替康(TPT)对Topo Ⅰ松弛活性的抑制呈现相似的变化趋势.CPUY013可使大部分BGC823细胞阻滞在S期,并诱导细胞凋亡;出现DNA片段化,亚G1峰显著增加,线粒体膜电位降低,荧光染色后出现凋亡细胞的特征性改变等.同时,CPUY013能明显抑制BGC823裸鼠移植瘤的生长,150 mg·kg-1剂量组的瘤重抑制率为62.1%.CPUYOl3使BGC823细胞内Topo Ⅰ和bel-2蛋白表达均有所下调,p53和bax蛋白表达有明显上调趋势,bcl-2/bax比值明显降低,caspase-3蛋白表达增高.新型Topo Ⅰ抑制剂CPUY013在体内明显抑制移植瘤的生长,体外可诱导细胞凋亡从而抑制BGC823细胞增殖,其机制可能与抑制Topo Ⅰ,从而下调bcl-2,上调bax和p53蛋白的表达有关.
탐토CPUY013재체내외대인위선암BGC823세포적항종류활성급기궤제.채용MTT법、극륭원형성법검측CPUY013대BGC823세포증식적억제작용;체외실험이pBR322 DNA위저물,의거질립적송이화초라선형식재경지당전영상영동도대약물억제해선적작용진행정성분석.용AO/EB형광염색기술、DNA응효전영급JC-1선립체막전위검측시제합검측세포조망.구복급약CPUY013후관찰기대라서이식류적생장억제작용;용류식세포술관찰CPUY013대BGC823세포주기적영향;채용Western blotting분별검측CPUY013처리후적BGC823세포중Topo Ⅰ급조망상관단백표체적개변.결과표명,CPUY013정명현적제량의뢰성억제BGC823세포적증식.수착제량적증가,CPUY013대Topo Ⅰ송이활성적억제추세증강.100 μmol·L-1 CPUY013화탁복체강(TPT)대Topo Ⅰ송이활성적억제정현상사적변화추세.CPUY013가사대부분BGC823세포조체재S기,병유도세포조망;출현DNA편단화,아G1봉현저증가,선립체막전위강저,형광염색후출현조망세포적특정성개변등.동시,CPUY013능명현억제BGC823라서이식류적생장,150 mg·kg-1제량조적류중억제솔위62.1%.CPUYOl3사BGC823세포내Topo Ⅰ화bel-2단백표체균유소하조,p53화bax단백표체유명현상조추세,bcl-2/bax비치명현강저,caspase-3단백표체증고.신형Topo Ⅰ억제제CPUY013재체내명현억제이식류적생장,체외가유도세포조망종이억제BGC823세포증식,기궤제가능여억제Topo Ⅰ,종이하조bcl-2,상조bax화p53단백적표체유관.