CAJ | 학술논문

根据我们实验室发现的鸭疫里默氏杆菌(RA)荚膜多糖蛋白基因序列(DQl51838),设计和合成荧光定量PCR引物和探针,建立了检测RA的实时荧光定量PCR方法.该法的表达式Y=-3.416X+39.492,相关系数1.000,PCR循环效率96.2%,DNA拷贝数在100～108范围内检测曲线有良好的线性关系.该法的最适Mg2+、引物和探针浓度分别为4～5mmol/L、0.16～O.2 μmol/L和0.16/μmol/L,最低能够检测到RA的DNA模板为2.0 copies/μL.1、10半数致死量的RA人工皮下注射感染7日龄樱桃谷鸭后2h即可在心、肝、肺、胸腺、食管中检测到RA核酸;感染后8h即可在心、肝、脾、肺、肾、脑、胰、食管、气管、胸腺、法氏囊、十二指肠、直肠、血液和咽喉拭子检测到RA核酸,36～120 h是RA在感染雏鸭除了咽喉、食管和气管各个组织器官繁殖数量最高峰期,其后逐渐下降.RA人工感染致死雏鸭的心、肝、脑RA分离和FQPCR检测符合率为100%.对I临床送检具有典型鸭疫里默氏杆菌病临床症状和病理变化的死亡雏鸭的肝脏、心血和脑组织的FQ-PCR检测的阳性率均为100%,而RA分离的阳性率分别只有74.3%(26/35)、82.9%(29/35)和91.4%(32/35).FQ-PCR可用于鸭疫里默氏杆菌感染的快速诊断、流行病学调查和鸭产品的检疫等.
근거아문실험실발현적압역리묵씨간균(RA)협막다당단백기인서렬(DQl51838),설계화합성형광정량PCR인물화탐침,건립료검측RA적실시형광정량PCR방법.해법적표체식Y=-3.416X+39.492,상관계수1.000,PCR순배효솔96.2%,DNA고패수재100～108범위내검측곡선유량호적선성관계.해법적최괄Mg2+、인물화탐침농도분별위4～5mmol/L、0.16～O.2 μmol/L화0.16/μmol/L,최저능구검측도RA적DNA모판위2.0 copies/μL.1、10반수치사량적RA인공피하주사감염7일령앵도곡압후2h즉가재심、간、폐、흉선、식관중검측도RA핵산;감염후8h즉가재심、간、비、폐、신、뇌、이、식관、기관、흉선、법씨낭、십이지장、직장、혈액화인후식자검측도RA핵산,36～120 h시RA재감염추압제료인후、식관화기관각개조직기관번식수량최고봉기,기후축점하강.RA인공감염치사추압적심、간、뇌RA분리화FQPCR검측부합솔위100%.대I림상송검구유전형압역리묵씨간균병림상증상화병리변화적사망추압적간장、심혈화뇌조직적FQ-PCR검측적양성솔균위100%,이RA분리적양성솔분별지유74.3%(26/35)、82.9%(29/35)화91.4%(32/35).FQ-PCR가용우압역리묵씨간균감염적쾌속진단、류행병학조사화압산품적검역등.