检验检疫学刊
檢驗檢疫學刊
검험검역학간
INSPECTION AND QUARANTINE SCIENCE
2014年
1期
58-61,50
,共5页
马铃薯Y病毒%基因组连接蛋白基因%原核表达%蛋白纯化
馬鈴藷Y病毒%基因組連接蛋白基因%原覈錶達%蛋白純化
마령서Y병독%기인조련접단백기인%원핵표체%단백순화
Potato virus Y%VPg Gene%Prokaryotic Expression%Protein Purification
设计合成马铃薯Y病毒基因组连接蛋白基因的特异引物，以本实验室获得的AQ4分离物cDNA为模板，通过PCR方法扩增得到目的基因，连入表达载体PEHISEGFPTEV及PEHISTEV，用IPTG诱导，使其在大肠杆菌中得到正确表达，并利用镍柱对VPg蛋白进行纯化，为抗血清的制备以及VPg蛋白晶体结构和互作蛋白的研究奠定基础。
設計閤成馬鈴藷Y病毒基因組連接蛋白基因的特異引物，以本實驗室穫得的AQ4分離物cDNA為模闆，通過PCR方法擴增得到目的基因，連入錶達載體PEHISEGFPTEV及PEHISTEV，用IPTG誘導，使其在大腸桿菌中得到正確錶達，併利用鎳柱對VPg蛋白進行純化，為抗血清的製備以及VPg蛋白晶體結構和互作蛋白的研究奠定基礎。
설계합성마령서Y병독기인조련접단백기인적특이인물，이본실험실획득적AQ4분리물cDNA위모판，통과PCR방법확증득도목적기인，련입표체재체PEHISEGFPTEV급PEHISTEV，용IPTG유도，사기재대장간균중득도정학표체，병이용얼주대VPg단백진행순화，위항혈청적제비이급VPg단백정체결구화호작단백적연구전정기출。
In this study, the specific primers of virus genome-linked protein (VPg) gene of PVY were designed. And the VPg gene was obtained by PCR with the cDNA of AQ4 isolates as a template. Then the sequence was cloned into expression vectors PEHISEGFPTEV and PCRPEHISTEV. Induced with IPTG, the gene was expressed successfully in Rossata strain of Escherichia coli. We purified VPg by Ni-NTA column, and the purified VPg could be used for it’s antiserum preparation, and for exploration of it’s structure or it’s interacting proteins.
