沈阳医学院学报
瀋暘醫學院學報
침양의학원학보
JOURNAL OF SHENYANG MEDICAL COLLEGE
2009年
3期
140-144
,共5页
田力%田晓晔%范妮娜%梁晓鹏%于鑫琛
田力%田曉曄%範妮娜%樑曉鵬%于鑫琛
전력%전효엽%범니나%량효붕%우흠침
股骨头缺血性坏死%骨髓间充质干细胞%血管内皮细胞生长因子165%诱导分化
股骨頭缺血性壞死%骨髓間充質榦細胞%血管內皮細胞生長因子165%誘導分化
고골두결혈성배사%골수간충질간세포%혈관내피세포생장인자165%유도분화
目的:探讨VEGF-165基因联合单纯骨髓间充质干细胞(mallow mesenchymal stem cells,MSCs)治疗激素性股骨头坏死的可行性.方法:1)体外分离、培养兔MSCs,纯化并鉴定兔MSCs;免疫荧光法检测细胞表面标志;传代培养后以1 μgPcDNA3.1-hVEGF165:3μl阳离子脂质体Lipofectamine的比例转染,通过ELISA检测转染后细胞中外源性VEGF的表达.2)测定在正常条件培养和成骨条件培养下,转染后细胞上清中碱性磷酸酶、骨钙素的水平.3)实验动物连续三天大剂量(40 mg/kg)臀部肌肉注射甲泼尼龙琥珀酸钠,通过MRI和组织病理学检查,建立动物模型.4)随机分成4组,每组14只.经皮穿刺于右侧股骨头,(1)生理盐水组,(2)单纯MSCs组,(3)hVEGF165基因转染MSCs组,(4)诱导分化后的hGVEF165基因转染MSCs组.8周后,组织病理学检查成骨和细胞成活情况.结果:1)hVEGF165基因转染的MSCs能成功分泌VEGF蛋白.2)成骨条件培养下,基因转染组细胞碱性磷酸酶和骨钙素的分泌量明显高于未转染组(P<0.05);而在正常条件培养下,基因转染组细胞碱性磷酸酶和骨钙素的表达分泌量较低.3)成功建立ANFH模型.4)组织学评分:生理盐水组1.8±0.72;单纯MSCs组8.54±0.37;hVEGF165基因转染MSCs组11.96±0.26;诱导分化后的hGVEF165基因转染MSCs组13.7±0.43,各组间差异有显著性(P<0.05).诱导分化转基因干细胞组与单纯干细胞组和生理盐水组之间差异非常显著(P<0.01).结论:诱导分化后的hVEGF165基因转染MSCs组成骨能力更好,修复股骨头缺血性坏死的能力也是最强.
目的:探討VEGF-165基因聯閤單純骨髓間充質榦細胞(mallow mesenchymal stem cells,MSCs)治療激素性股骨頭壞死的可行性.方法:1)體外分離、培養兔MSCs,純化併鑒定兔MSCs;免疫熒光法檢測細胞錶麵標誌;傳代培養後以1 μgPcDNA3.1-hVEGF165:3μl暘離子脂質體Lipofectamine的比例轉染,通過ELISA檢測轉染後細胞中外源性VEGF的錶達.2)測定在正常條件培養和成骨條件培養下,轉染後細胞上清中堿性燐痠酶、骨鈣素的水平.3)實驗動物連續三天大劑量(40 mg/kg)臀部肌肉註射甲潑尼龍琥珀痠鈉,通過MRI和組織病理學檢查,建立動物模型.4)隨機分成4組,每組14隻.經皮穿刺于右側股骨頭,(1)生理鹽水組,(2)單純MSCs組,(3)hVEGF165基因轉染MSCs組,(4)誘導分化後的hGVEF165基因轉染MSCs組.8週後,組織病理學檢查成骨和細胞成活情況.結果:1)hVEGF165基因轉染的MSCs能成功分泌VEGF蛋白.2)成骨條件培養下,基因轉染組細胞堿性燐痠酶和骨鈣素的分泌量明顯高于未轉染組(P<0.05);而在正常條件培養下,基因轉染組細胞堿性燐痠酶和骨鈣素的錶達分泌量較低.3)成功建立ANFH模型.4)組織學評分:生理鹽水組1.8±0.72;單純MSCs組8.54±0.37;hVEGF165基因轉染MSCs組11.96±0.26;誘導分化後的hGVEF165基因轉染MSCs組13.7±0.43,各組間差異有顯著性(P<0.05).誘導分化轉基因榦細胞組與單純榦細胞組和生理鹽水組之間差異非常顯著(P<0.01).結論:誘導分化後的hVEGF165基因轉染MSCs組成骨能力更好,脩複股骨頭缺血性壞死的能力也是最彊.
목적:탐토VEGF-165기인연합단순골수간충질간세포(mallow mesenchymal stem cells,MSCs)치료격소성고골두배사적가행성.방법:1)체외분리、배양토MSCs,순화병감정토MSCs;면역형광법검측세포표면표지;전대배양후이1 μgPcDNA3.1-hVEGF165:3μl양리자지질체Lipofectamine적비례전염,통과ELISA검측전염후세포중외원성VEGF적표체.2)측정재정상조건배양화성골조건배양하,전염후세포상청중감성린산매、골개소적수평.3)실험동물련속삼천대제량(40 mg/kg)둔부기육주사갑발니룡호박산납,통과MRI화조직병이학검사,건립동물모형.4)수궤분성4조,매조14지.경피천자우우측고골두,(1)생리염수조,(2)단순MSCs조,(3)hVEGF165기인전염MSCs조,(4)유도분화후적hGVEF165기인전염MSCs조.8주후,조직병이학검사성골화세포성활정황.결과:1)hVEGF165기인전염적MSCs능성공분비VEGF단백.2)성골조건배양하,기인전염조세포감성린산매화골개소적분비량명현고우미전염조(P<0.05);이재정상조건배양하,기인전염조세포감성린산매화골개소적표체분비량교저.3)성공건립ANFH모형.4)조직학평분:생리염수조1.8±0.72;단순MSCs조8.54±0.37;hVEGF165기인전염MSCs조11.96±0.26;유도분화후적hGVEF165기인전염MSCs조13.7±0.43,각조간차이유현저성(P<0.05).유도분화전기인간세포조여단순간세포조화생리염수조지간차이비상현저(P<0.01).결론:유도분화후적hVEGF165기인전염MSCs조성골능력경호,수복고골두결혈성배사적능력야시최강.
