中国临床神经科学
中國臨床神經科學
중국림상신경과학
CHINESE JOURNAL OF CLINICAL NEUROSCIENCES
2009年
6期
601-605
,共5页
赵桂宪%吴志英%陈万金%林毅%王柠
趙桂憲%吳誌英%陳萬金%林毅%王檸
조계헌%오지영%진만금%림의%왕저
免疫相关鸟苷三磷酸酶基因%融合蛋白%多克隆抗体
免疫相關鳥苷三燐痠酶基因%融閤蛋白%多剋隆抗體
면역상관조감삼린산매기인%융합단백%다극륭항체
目的:表达人免疫相关鸟苷三磷酸酶基因(IRGM)a全长融合蛋白,制备高质量的兔抗人IRGM多克隆抗体.方法:将IRGMa全长cDNA片段分别克隆到原核表达载体pGEX-4T-2和真核表达载体pCMV-myc,测序验证序列正确.在大肠埃希菌E.coli BL21中表达IRGMa/GST融合蛋白,用纯化的可溶性IRGMa/GST融合蛋白免疫新西兰大白兔,制备兔抗人IRGM抗体,采用ELISA、免疫印迹和竞争抑制等多种方法验证其敏感度和特异度.结果:自制的兔抗人IRGM多克隆抗体的特异度和敏感度均较高,效价更高于市售抗体.结论:成功制备了兔抗人IRGM多克隆抗体,为进一步的功能研究打下基础.
目的:錶達人免疫相關鳥苷三燐痠酶基因(IRGM)a全長融閤蛋白,製備高質量的兔抗人IRGM多剋隆抗體.方法:將IRGMa全長cDNA片段分彆剋隆到原覈錶達載體pGEX-4T-2和真覈錶達載體pCMV-myc,測序驗證序列正確.在大腸埃希菌E.coli BL21中錶達IRGMa/GST融閤蛋白,用純化的可溶性IRGMa/GST融閤蛋白免疫新西蘭大白兔,製備兔抗人IRGM抗體,採用ELISA、免疫印跡和競爭抑製等多種方法驗證其敏感度和特異度.結果:自製的兔抗人IRGM多剋隆抗體的特異度和敏感度均較高,效價更高于市售抗體.結論:成功製備瞭兔抗人IRGM多剋隆抗體,為進一步的功能研究打下基礎.
목적:표체인면역상관조감삼린산매기인(IRGM)a전장융합단백,제비고질량적토항인IRGM다극륭항체.방법:장IRGMa전장cDNA편단분별극륭도원핵표체재체pGEX-4T-2화진핵표체재체pCMV-myc,측서험증서렬정학.재대장애희균E.coli BL21중표체IRGMa/GST융합단백,용순화적가용성IRGMa/GST융합단백면역신서란대백토,제비토항인IRGM항체,채용ELISA、면역인적화경쟁억제등다충방법험증기민감도화특이도.결과:자제적토항인IRGM다극륭항체적특이도화민감도균교고,효개경고우시수항체.결론:성공제비료토항인IRGM다극륭항체,위진일보적공능연구타하기출.
