生物学杂志
生物學雜誌
생물학잡지
JOURNAL OF BIOLOGY
2013年
2期
1-4
,共4页
王一恬%沈微%陈献忠%樊游%王正祥
王一恬%瀋微%陳獻忠%樊遊%王正祥
왕일념%침미%진헌충%번유%왕정상
克劳氏芽孢杆菌%尿酸氧化酶%高碱性%异源表达
剋勞氏芽孢桿菌%尿痠氧化酶%高堿性%異源錶達
극로씨아포간균%뇨산양화매%고감성%이원표체
以碱性蛋白酶生产菌克劳氏芽孢杆菌(Bacillus clausii)基因组DNA为模板PCR扩增获得尿酸氧化酶基因(BcU),插入原核表达载体pET28α中,构建表达载体pET-BcU,并转化大肠杆菌BL21(DE3)获得重组大肠杆菌BL21(DE3)/pET-BcU.经IPTG诱导,重组菌BL21(DE3)/pET-BcU表达出有活性的尿酸氧化酶,含空质粒的重组菌在同样条件下没有酶活.酶学性质分析显示,重组酶最适pH值为9.0,在pH值9.0~11范围内酶活几乎不变,是一种高碱性尿酸氧化酶.
以堿性蛋白酶生產菌剋勞氏芽孢桿菌(Bacillus clausii)基因組DNA為模闆PCR擴增穫得尿痠氧化酶基因(BcU),插入原覈錶達載體pET28α中,構建錶達載體pET-BcU,併轉化大腸桿菌BL21(DE3)穫得重組大腸桿菌BL21(DE3)/pET-BcU.經IPTG誘導,重組菌BL21(DE3)/pET-BcU錶達齣有活性的尿痠氧化酶,含空質粒的重組菌在同樣條件下沒有酶活.酶學性質分析顯示,重組酶最適pH值為9.0,在pH值9.0~11範圍內酶活幾乎不變,是一種高堿性尿痠氧化酶.
이감성단백매생산균극로씨아포간균(Bacillus clausii)기인조DNA위모판PCR확증획득뇨산양화매기인(BcU),삽입원핵표체재체pET28α중,구건표체재체pET-BcU,병전화대장간균BL21(DE3)획득중조대장간균BL21(DE3)/pET-BcU.경IPTG유도,중조균BL21(DE3)/pET-BcU표체출유활성적뇨산양화매,함공질립적중조균재동양조건하몰유매활.매학성질분석현시,중조매최괄pH치위9.0,재pH치9.0~11범위내매활궤호불변,시일충고감성뇨산양화매.
