CAJ | 학술논문

目的建立卵巢颗粒细胞的原代培养体系,探讨哈蟆油含药血清对大鼠卵巢颗粒细胞增殖及分泌的影响,并分析和选择哈蟆油含药血清对颗粒细胞的最佳作用浓度,为进一步体外实验奠定基础.方法采用SD雌性大鼠,皮下注射孕马血清促性腺激素,剖取双侧卵巢,采用机械分离方法释放卵巢颗粒细胞,分离培养.将体积分数为15％,30％,60％,120％,240％(大鼠灌胃浓度4.5 g/kg)的含药血清5个终浓度分别加入培养体系中,通过四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)检测细胞增殖情况及药物的最大无毒浓度(TD0),观察其对卵巢颗粒细胞生长的影响.采用电化学发光法测定培养基中雌二醇(E2)的含量,分析哈蟆油合药血清对颗粒细胞雌激素分泌的影响.运用流式细胞术检测活细胞及凋亡细胞所占的比率.结果含药血清作用颗粒细胞后,呈现出不同程度的促增殖作用,含药血清最佳的作用浓度体积分数为15％～30％(大鼠灌胃哈蟆油剂量为4.5 g/kg)之间；哈蟆油含药血清可促进卵巢颗粒细胞分泌雌二醇,雌二醇含量分析显示雌二醇的分泌与细胞增殖情况存在正相关关系(Person r=0.406,P=0.01)；流式细胞结果显示与空白含药血清比较,哈蟆油含药血清均能显著增加活细胞数目,抑制细胞无血清饥饿引发的凋亡(P值均小于0.01),起到细胞保护作用,其中体积分数为25％的含药血清作用效果更佳(P＜0.01).结论哈蟆油含药血清对离体培养的卵巢颗粒细胞增殖具有显著的促进作用,并存在一个最佳作用浓度范围,其调节机体性激素生成作用与促进卵巢颗粒细胞生长效应相关.
목적 건립란소과립세포적원대배양체계,탐토합마유함약혈청대대서란소과립세포증식급분비적영향,병분석화선택합마유함약혈청대과립세포적최가작용농도,위진일보체외실험전정기출.방법 채용SD자성대서,피하주사잉마혈청촉성선격소,부취쌍측란소,채용궤계분리방법석방란소과립세포,분리배양.장체적분수위15％,30％,60％,120％,240％(대서관위농도4.5 g/kg)적함약혈청5개종농도분별가입배양체계중,통과사갑기우담서염미량매반응비색법(MTT)검측세포증식정황급약물적최대무독농도(TD0),관찰기대란소과립세포생장적영향.채용전화학발광법측정배양기중자이순(E2)적함량,분석합마유합약혈청대과립세포자격소분비적영향.운용류식세포술검측활세포급조망세포소점적비솔.결과 함약혈청작용과립세포후,정현출불동정도적촉증식작용,함약혈청최가적작용농도체적분수위15％～30％(대서관위합마유제량위4.5 g/kg)지간；합마유함약혈청가촉진란소과립세포분비자이순,자이순함량분석현시자이순적분비여세포증식정황존재정상관관계(Person r=0.406,P=0.01)；류식세포결과현시여공백함약혈청비교,합마유함약혈청균능현저증가활세포수목,억제세포무혈청기아인발적조망(P치균소우0.01),기도세포보호작용,기중체적분수위25％적함약혈청작용효과경가(P＜0.01).결론 합마유함약혈청대리체배양적란소과립세포증식구유현저적촉진작용,병존재일개최가작용농도범위,기조절궤체성격소생성작용여촉진란소과립세포생장효응상관.