皖南医学院学报
皖南醫學院學報
환남의학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE WANNAN
2013年
2期
87-91
,共5页
姜玉新%郭伟%马玉成%刘志明%陈琪%李朝品
薑玉新%郭偉%馬玉成%劉誌明%陳琪%李朝品
강옥신%곽위%마옥성%류지명%진기%리조품
DNA改组%Der f 1%Der f 3%融合基因
DNA改組%Der f 1%Der f 3%融閤基因
DNA개조%Der f 1%Der f 3%융합기인
目的:探索粉尘螨变应原基因Der f 1和Der f 3改组条件,以期获得粉尘螨变应原融合突变基因.方法:RT-PCR方法扩增粉尘螨变应原Der f 1和Der f 3基因,用DnaseⅠ分别酶解Der f 1和Der f 3基因10、15、20、25、30 min;酶解相同时间的Der f 1和Der f 3基因片段两两混合,采用DNA shuffling技术对粉尘螨变应原Der f 1和Der f 3基因进行重组,琼脂糖凝胶电泳检测重组子.结果:以Der f 2 F和Der f 2 R为引物在酶切10、15、20、25、30 min均可扩增出清晰条带;以Der f 1 F和Der f 1 R、Der f 1 F和Der f 2 R、Der f 2 F和Der f 1 R为引物在酶切10、15、20、25、30 min的模板中均无条带出现;而其他引物组合则在不同酶切时间的模板中均出现条带.结论:通过多种条件的组合,可获得多个粉尘螨变应原基因Der f 1和Der f 3间的融合基因,为大规模制备高效、低价的哮喘疫苗奠定了基础.
目的:探索粉塵螨變應原基因Der f 1和Der f 3改組條件,以期穫得粉塵螨變應原融閤突變基因.方法:RT-PCR方法擴增粉塵螨變應原Der f 1和Der f 3基因,用DnaseⅠ分彆酶解Der f 1和Der f 3基因10、15、20、25、30 min;酶解相同時間的Der f 1和Der f 3基因片段兩兩混閤,採用DNA shuffling技術對粉塵螨變應原Der f 1和Der f 3基因進行重組,瓊脂糖凝膠電泳檢測重組子.結果:以Der f 2 F和Der f 2 R為引物在酶切10、15、20、25、30 min均可擴增齣清晰條帶;以Der f 1 F和Der f 1 R、Der f 1 F和Der f 2 R、Der f 2 F和Der f 1 R為引物在酶切10、15、20、25、30 min的模闆中均無條帶齣現;而其他引物組閤則在不同酶切時間的模闆中均齣現條帶.結論:通過多種條件的組閤,可穫得多箇粉塵螨變應原基因Der f 1和Der f 3間的融閤基因,為大規模製備高效、低價的哮喘疫苗奠定瞭基礎.
목적:탐색분진만변응원기인Der f 1화Der f 3개조조건,이기획득분진만변응원융합돌변기인.방법:RT-PCR방법확증분진만변응원Der f 1화Der f 3기인,용DnaseⅠ분별매해Der f 1화Der f 3기인10、15、20、25、30 min;매해상동시간적Der f 1화Der f 3기인편단량량혼합,채용DNA shuffling기술대분진만변응원Der f 1화Der f 3기인진행중조,경지당응효전영검측중조자.결과:이Der f 2 F화Der f 2 R위인물재매절10、15、20、25、30 min균가확증출청석조대;이Der f 1 F화Der f 1 R、Der f 1 F화Der f 2 R、Der f 2 F화Der f 1 R위인물재매절10、15、20、25、30 min적모판중균무조대출현;이기타인물조합칙재불동매절시간적모판중균출현조대.결론:통과다충조건적조합,가획득다개분진만변응원기인Der f 1화Der f 3간적융합기인,위대규모제비고효、저개적효천역묘전정료기출.
