华北农学报
華北農學報
화북농학보
ACTA AGRICULTURAE BOREALI-SINICA
2012年
5期
44-48
,共5页
胡骁飞%魏凤仙%李青梅%职爱民%王方雨%孙亚宁%柴书军%付晓鹤
鬍驍飛%魏鳳仙%李青梅%職愛民%王方雨%孫亞寧%柴書軍%付曉鶴
호효비%위봉선%리청매%직애민%왕방우%손아저%시서군%부효학
植酸酶%杂交瘤%单克隆抗体%ELISA
植痠酶%雜交瘤%單剋隆抗體%ELISA
식산매%잡교류%단극륭항체%ELISA
通过细胞融合建立分泌抗植酸酶单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞株.采用体内诱生腹水法制备单克隆抗体,并对其免疫学特性进行鉴定.结果表明,筛选出2株杂交瘤细胞,其中,5C3细胞株产生单抗亚型为IgG1型,效价为1:(1.02x106),IC50=100.07 ng/mL,亲和常数为6.70×109L/mol,与市售常规植酸酶、包被植酸酶及浓缩植酸酶的IC50分别达到130.43,126.16,125.33 ng/mL,交叉反应率分别为76.72％,79.32％和79.84％.与高温失活(100℃水煮5 min)的麸皮植酸酶、普通植酸酶、包被植酸酶及浓缩植酸酶IC50分别为4 205.45,4 015.86,3 593.19,3 610.40ng/mL,交叉反应率分别为2.38％,2.49％,2.78％,2.77％.说明成功筛选了杂交瘤细胞株,该细胞株能分泌抗植酸酶mAb,该植酸酶mAb对植酸酶亲和力高、特异性强、灵敏度好,为植酸酶ELISA检测试剂盒及试纸条研制奠定了基础.
通過細胞融閤建立分泌抗植痠酶單剋隆抗體(mAb)的雜交瘤細胞株.採用體內誘生腹水法製備單剋隆抗體,併對其免疫學特性進行鑒定.結果錶明,篩選齣2株雜交瘤細胞,其中,5C3細胞株產生單抗亞型為IgG1型,效價為1:(1.02x106),IC50=100.07 ng/mL,親和常數為6.70×109L/mol,與市售常規植痠酶、包被植痠酶及濃縮植痠酶的IC50分彆達到130.43,126.16,125.33 ng/mL,交扠反應率分彆為76.72％,79.32％和79.84％.與高溫失活(100℃水煮5 min)的麩皮植痠酶、普通植痠酶、包被植痠酶及濃縮植痠酶IC50分彆為4 205.45,4 015.86,3 593.19,3 610.40ng/mL,交扠反應率分彆為2.38％,2.49％,2.78％,2.77％.說明成功篩選瞭雜交瘤細胞株,該細胞株能分泌抗植痠酶mAb,該植痠酶mAb對植痠酶親和力高、特異性彊、靈敏度好,為植痠酶ELISA檢測試劑盒及試紙條研製奠定瞭基礎.
통과세포융합건립분비항식산매단극륭항체(mAb)적잡교류세포주.채용체내유생복수법제비단극륭항체,병대기면역학특성진행감정.결과표명,사선출2주잡교류세포,기중,5C3세포주산생단항아형위IgG1형,효개위1:(1.02x106),IC50=100.07 ng/mL,친화상수위6.70×109L/mol,여시수상규식산매、포피식산매급농축식산매적IC50분별체도130.43,126.16,125.33 ng/mL,교차반응솔분별위76.72％,79.32％화79.84％.여고온실활(100℃수자5 min)적부피식산매、보통식산매、포피식산매급농축식산매IC50분별위4 205.45,4 015.86,3 593.19,3 610.40ng/mL,교차반응솔분별위2.38％,2.49％,2.78％,2.77％.설명성공사선료잡교류세포주,해세포주능분비항식산매mAb,해식산매mAb대식산매친화력고、특이성강、령민도호,위식산매ELISA검측시제합급시지조연제전정료기출.
