华北农学报
華北農學報
화북농학보
ACTA AGRICULTURAE BOREALI-SINICA
2012年
5期
28-32
,共5页
王瑜晖%辛明明%宋娜%彭福祥%唐华山%李映辉%倪中福%解超杰%孙其信
王瑜暉%辛明明%宋娜%彭福祥%唐華山%李映輝%倪中福%解超傑%孫其信
왕유휘%신명명%송나%팽복상%당화산%리영휘%예중복%해초걸%손기신
小麦白粉菌%瞬时表达技术%CAF1基因%BI-1基因%DAD1基因
小麥白粉菌%瞬時錶達技術%CAF1基因%BI-1基因%DAD1基因
소맥백분균%순시표체기술%CAF1기인%BI-1기인%DAD1기인
利用小麦离体叶片瞬时表达技术分析了3个小麦抗白粉病相关基因CAF1、BI-1和DAD1的功能.根据小麦响应白粉菌侵染的差异表达基因芯片检测结果,筛选出表达差异的抗病相关基因CAFI和BI-1,并挑选与植物程序性死亡相关的基因DAD1,将克隆到的这3个小麦基因全长ORF序列构建入超表达载体pAHC25中,利用瞬时表达技术检测目标基因和GUS基因共转化的阳性小麦叶片表皮细胞中白粉菌成功侵入并形成吸器的细胞比例(侵入频率),研究目标基因的超表达后对白粉菌入侵及吸器形成产生的影响.结果表明,小麦CAF1基因在感病小麦品种叶片中的瞬时表达,对白粉病侵入和吸器形成具有一定的抑制作用(侵入频率为(37.37±3.2)％,对照为(54.75±0.6)％),在一定程度上增强了表达细胞对白粉菌的抗性；表达DAD1基因则可能在一定程度上有利于白粉菌吸器的形成(侵入频率为(57.34±1,1)％,对照为(50.93±1.3)％)；而在感病叶片中表达基因BI-1对白粉菌吸器形成没有明显影响(侵入频率为(54.31±1.7)％,对照为(52.37±1.8)％).
利用小麥離體葉片瞬時錶達技術分析瞭3箇小麥抗白粉病相關基因CAF1、BI-1和DAD1的功能.根據小麥響應白粉菌侵染的差異錶達基因芯片檢測結果,篩選齣錶達差異的抗病相關基因CAFI和BI-1,併挑選與植物程序性死亡相關的基因DAD1,將剋隆到的這3箇小麥基因全長ORF序列構建入超錶達載體pAHC25中,利用瞬時錶達技術檢測目標基因和GUS基因共轉化的暘性小麥葉片錶皮細胞中白粉菌成功侵入併形成吸器的細胞比例(侵入頻率),研究目標基因的超錶達後對白粉菌入侵及吸器形成產生的影響.結果錶明,小麥CAF1基因在感病小麥品種葉片中的瞬時錶達,對白粉病侵入和吸器形成具有一定的抑製作用(侵入頻率為(37.37±3.2)％,對照為(54.75±0.6)％),在一定程度上增彊瞭錶達細胞對白粉菌的抗性；錶達DAD1基因則可能在一定程度上有利于白粉菌吸器的形成(侵入頻率為(57.34±1,1)％,對照為(50.93±1.3)％)；而在感病葉片中錶達基因BI-1對白粉菌吸器形成沒有明顯影響(侵入頻率為(54.31±1.7)％,對照為(52.37±1.8)％).
이용소맥리체협편순시표체기술분석료3개소맥항백분병상관기인CAF1、BI-1화DAD1적공능.근거소맥향응백분균침염적차이표체기인심편검측결과,사선출표체차이적항병상관기인CAFI화BI-1,병도선여식물정서성사망상관적기인DAD1,장극륭도적저3개소맥기인전장ORF서렬구건입초표체재체pAHC25중,이용순시표체기술검측목표기인화GUS기인공전화적양성소맥협편표피세포중백분균성공침입병형성흡기적세포비례(침입빈솔),연구목표기인적초표체후대백분균입침급흡기형성산생적영향.결과표명,소맥CAF1기인재감병소맥품충협편중적순시표체,대백분병침입화흡기형성구유일정적억제작용(침입빈솔위(37.37±3.2)％,대조위(54.75±0.6)％),재일정정도상증강료표체세포대백분균적항성；표체DAD1기인칙가능재일정정도상유리우백분균흡기적형성(침입빈솔위(57.34±1,1)％,대조위(50.93±1.3)％)；이재감병협편중표체기인BI-1대백분균흡기형성몰유명현영향(침입빈솔위(54.31±1.7)％,대조위(52.37±1.8)％).
