解放军医药杂志
解放軍醫藥雜誌
해방군의약잡지
MEDICAL&PHARMACEUTICAL JOURNAL OF CHINESE PEOPLE'S LIBERATION ARMY
2013年
4期
10-14
,共5页
李振彬%辛立波%徐铮%齐静%何东仪%杨静
李振彬%辛立波%徐錚%齊靜%何東儀%楊靜
리진빈%신립파%서쟁%제정%하동의%양정
雷公藤多苷%成纤维样滑膜细胞%细胞增殖%细胞核因子-κB受体活化因子配体%骨保护素%大鼠
雷公籐多苷%成纖維樣滑膜細胞%細胞增殖%細胞覈因子-κB受體活化因子配體%骨保護素%大鼠
뢰공등다감%성섬유양활막세포%세포증식%세포핵인자-κB수체활화인자배체%골보호소%대서
目的 观察雷公藤多苷(tripterygium glycoside,TG)对重组鼠巨噬细胞移动抑制因子(recombinant mouse macrophage migration inhibitory factor,rmMIF)诱导大鼠成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)的增殖及其细胞核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor kappaB ligand,RANKL)、骨保护素(osteoprotegerin,OPG)表达的干预作用.方法 采用大鼠FLS细胞株RSC-364,常规方法 复苏、培养、传代,实验用3～5代FLS.分为4组:空白对照组加入200 μl DMEM培养液,另3组分别加入200 μl含rmMIF(200 ng/ml)(MIF组)、rmMIF(200 ng/ml)+TG(20 μg/ml)(MIF+TG组)、rmMIF(200ng/ml)+MTX(0.5 μg/ml)(MIF+MTX组)的DMEM培养液.置37℃、5%CO2孵箱培养48 h.MTT法检测FLS的增殖活性;免疫组化法检测滑膜细胞OPG/RANKL的表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测FLS上清液OPG、RANKL表达.结果 MIF组增殖活性高于空白对照组,MIF+TG组、MIF+MTX组增殖活性低于空白对照组和MIF组(P＜0.01).MIF+TG组和MIF+MTX组细胞OPG标记指数均高于空白对照组和MIF组,MIF+TG组OPG标记指数高于MIF+MTX组(P＜0.01,P＜0.05).MIF组细胞RANKL标记指数高于空白对照组,MIF+TG组、MIF+MTX组RANKL标记指数均低于MIF组(P＜0.05,P＜0.01).MIF组上清液RANKL浓度和RANKL/OPG值均高于空白对照组,MIF+MTX组上清液RANKL浓度低于空白对照组(P＜0.05,P＜0.01);MIF+TG组和MIF+MTX组上清液RANKL浓度和RANKL/OPG值均低于MIF组(P＜0.01).结论 rmMIF可促进体外培养大鼠FLS增殖,上调FLS的RANKL表达和RANKL/OPG值;TG抑制rmMIF诱导的大鼠FLS增殖、降低rmMIF诱导大鼠FLS分泌RANKL、下调FLS的RANKL表达和RANKL/OPG比值,可能是其治疗类风湿关节炎的骨免疫学机制之一.
目的 觀察雷公籐多苷(tripterygium glycoside,TG)對重組鼠巨噬細胞移動抑製因子(recombinant mouse macrophage migration inhibitory factor,rmMIF)誘導大鼠成纖維樣滑膜細胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)的增殖及其細胞覈因子-κB受體活化因子配體(receptor activator of nuclear factor kappaB ligand,RANKL)、骨保護素(osteoprotegerin,OPG)錶達的榦預作用.方法 採用大鼠FLS細胞株RSC-364,常規方法 複囌、培養、傳代,實驗用3～5代FLS.分為4組:空白對照組加入200 μl DMEM培養液,另3組分彆加入200 μl含rmMIF(200 ng/ml)(MIF組)、rmMIF(200 ng/ml)+TG(20 μg/ml)(MIF+TG組)、rmMIF(200ng/ml)+MTX(0.5 μg/ml)(MIF+MTX組)的DMEM培養液.置37℃、5%CO2孵箱培養48 h.MTT法檢測FLS的增殖活性;免疫組化法檢測滑膜細胞OPG/RANKL的錶達;酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測FLS上清液OPG、RANKL錶達.結果 MIF組增殖活性高于空白對照組,MIF+TG組、MIF+MTX組增殖活性低于空白對照組和MIF組(P＜0.01).MIF+TG組和MIF+MTX組細胞OPG標記指數均高于空白對照組和MIF組,MIF+TG組OPG標記指數高于MIF+MTX組(P＜0.01,P＜0.05).MIF組細胞RANKL標記指數高于空白對照組,MIF+TG組、MIF+MTX組RANKL標記指數均低于MIF組(P＜0.05,P＜0.01).MIF組上清液RANKL濃度和RANKL/OPG值均高于空白對照組,MIF+MTX組上清液RANKL濃度低于空白對照組(P＜0.05,P＜0.01);MIF+TG組和MIF+MTX組上清液RANKL濃度和RANKL/OPG值均低于MIF組(P＜0.01).結論 rmMIF可促進體外培養大鼠FLS增殖,上調FLS的RANKL錶達和RANKL/OPG值;TG抑製rmMIF誘導的大鼠FLS增殖、降低rmMIF誘導大鼠FLS分泌RANKL、下調FLS的RANKL錶達和RANKL/OPG比值,可能是其治療類風濕關節炎的骨免疫學機製之一.
목적 관찰뢰공등다감(tripterygium glycoside,TG)대중조서거서세포이동억제인자(recombinant mouse macrophage migration inhibitory factor,rmMIF)유도대서성섬유양활막세포(fibroblast-like synoviocytes,FLS)적증식급기세포핵인자-κB수체활화인자배체(receptor activator of nuclear factor kappaB ligand,RANKL)、골보호소(osteoprotegerin,OPG)표체적간예작용.방법 채용대서FLS세포주RSC-364,상규방법 복소、배양、전대,실험용3～5대FLS.분위4조:공백대조조가입200 μl DMEM배양액,령3조분별가입200 μl함rmMIF(200 ng/ml)(MIF조)、rmMIF(200 ng/ml)+TG(20 μg/ml)(MIF+TG조)、rmMIF(200ng/ml)+MTX(0.5 μg/ml)(MIF+MTX조)적DMEM배양액.치37℃、5%CO2부상배양48 h.MTT법검측FLS적증식활성;면역조화법검측활막세포OPG/RANKL적표체;매련면역흡부시험(ELISA)검측FLS상청액OPG、RANKL표체.결과 MIF조증식활성고우공백대조조,MIF+TG조、MIF+MTX조증식활성저우공백대조조화MIF조(P＜0.01).MIF+TG조화MIF+MTX조세포OPG표기지수균고우공백대조조화MIF조,MIF+TG조OPG표기지수고우MIF+MTX조(P＜0.01,P＜0.05).MIF조세포RANKL표기지수고우공백대조조,MIF+TG조、MIF+MTX조RANKL표기지수균저우MIF조(P＜0.05,P＜0.01).MIF조상청액RANKL농도화RANKL/OPG치균고우공백대조조,MIF+MTX조상청액RANKL농도저우공백대조조(P＜0.05,P＜0.01);MIF+TG조화MIF+MTX조상청액RANKL농도화RANKL/OPG치균저우MIF조(P＜0.01).결론 rmMIF가촉진체외배양대서FLS증식,상조FLS적RANKL표체화RANKL/OPG치;TG억제rmMIF유도적대서FLS증식、강저rmMIF유도대서FLS분비RANKL、하조FLS적RANKL표체화RANKL/OPG비치,가능시기치료류풍습관절염적골면역학궤제지일.
