CAJ | 학술논문

为了探究盐生植物的耐盐机制,比较不同盐生植物超氧化物歧化酶(SOD)基因耐盐性的大小,采用RACE技术克隆了盐角草锰和铜/锌两种SOD的cDNA全长.序列分析表明,盐角草MnSOD基因(SeMSD,GenBank登录号为JQ061158)含有699 bp的开放阅读框,编码一个长233个氨基酸的多肽,其预测相对分子量为25.7 kD.Cu/ZnSOD基因(SeCSD,GenBank登录号为JQ061160)开放阅读框长为684 bp,并编码228个氨基酸的多肽,相对分子量为23.3 kD.根据已获得的这两个cDNA序列和GenBank公布的盐芥MnSOD基因序列(ThMSD,EF140719),构建了3个原核表达载体pET30a-SeMSD、pET30a-SeCSD和pET30a-ThMSD,并将它们转化大肠杆菌BL21,成功表达出了目的蛋白.通过优化IPTG的诱导浓度,在6.5％和7.5％盐度下对这3个SOD基因的耐盐能力验证结果显示,相比对照菌BL21 (pET30a),转化了pET30a-SeMSD和pET30a-ThMSD载体的重组菌具有更高的耐盐性,而转化pET30a-SeCSD载体的重组菌没有表现出耐盐性的提高.
위료탐구염생식물적내염궤제,비교불동염생식물초양화물기화매(SOD)기인내염성적대소,채용RACE기술극륭료염각초맹화동/자량충SOD적cDNA전장.서렬분석표명,염각초MnSOD기인(SeMSD,GenBank등록호위JQ061158)함유699 bp적개방열독광,편마일개장233개안기산적다태,기예측상대분자량위25.7 kD.Cu/ZnSOD기인(SeCSD,GenBank등록호위JQ061160)개방열독광장위684 bp,병편마228개안기산적다태,상대분자량위23.3 kD.근거이획득적저량개cDNA서렬화GenBank공포적염개MnSOD기인서렬(ThMSD,EF140719),구건료3개원핵표체재체pET30a-SeMSD、pET30a-SeCSD화pET30a-ThMSD,병장타문전화대장간균BL21,성공표체출료목적단백.통과우화IPTG적유도농도,재6.5％화7.5％염도하대저3개SOD기인적내염능력험증결과현시,상비대조균BL21 (pET30a),전화료pET30a-SeMSD화pET30a-ThMSD재체적중조균구유경고적내염성,이전화pET30a-SeCSD재체적중조균몰유표현출내염성적제고.