CX43腺病毒表达载体的构建及其在人胃癌BGC-823细胞系的表达
CX43선병독표체재체적구건급기재인위암BGC-823세포계적표체
CX43 adenovirus vector and its expression in human gastric cancer BGC-823 cell line
  • 万方数据
    现代肿瘤医学 현대종류의학
    JOURNAL OF MODERN ONCOLOGY
    2012年 11期 2231-2236 ,共6页

    吴瑾%刘文涛%李永庆%周红凤%刘丹%岳晓龙%孙喜文%石光跃%赵艳滨%王亚丽%仇鑫

    오근%류문도%리영경%주홍봉%류단%악효룡%손희문%석광약%조염빈%왕아려%구흠

    连接蛋白43%重组%腺病毒%载体 連接蛋白43%重組%腺病毒%載體
    련접단백43%중조%선병독%재체
    目的:构建并鉴定CX43-IRES2-EGFP的重组腺病毒小质粒表达载体,观察其在人胃癌BGC-823细胞系中的表达.方法:将目的基因CX43片段与IRES2-EGFP进行PCR拼接,重组到腺病毒穿梭载体pAd/CMV/V5-DEST上,构建成腺病毒表达载体pAd-CX43-IRES2-EGFP;经酶切后转染293A细胞进行包装,测定滴度;重组病毒转染人胃癌BGC-823细胞后,通过RT-PCR检测耐药基因MDR的变化,Westernblot检测CX43超表达.结果:经测序验证,腺病毒载体pAd-CX43-IRES2-EGFP构建成功.pAd-CX43-IRES2-EGFP病毒的滴度为:2.8×106 ifu/ml.转染人胃癌BGC-823细胞后经Western blot检测到CX43蛋白超表达,耐药基因MDR受到抑制.结论:成功构建腺病毒载体pAd-CX43-IRES2-EGFP高效体外转染表达体系,检测其对人胃癌BGC-823细胞系具有超表达CX43和抑制耐药基因MDR的作用,为CX43基因转染的研究及基于CX43为靶标的基因药物筛选平台的奠定了基础.
    목적:구건병감정CX43-IRES2-EGFP적중조선병독소질립표체재체,관찰기재인위암BGC-823세포계중적표체.방법:장목적기인CX43편단여IRES2-EGFP진행PCR병접,중조도선병독천사재체pAd/CMV/V5-DEST상,구건성선병독표체재체pAd-CX43-IRES2-EGFP;경매절후전염293A세포진행포장,측정적도;중조병독전염인위암BGC-823세포후,통과RT-PCR검측내약기인MDR적변화,Westernblot검측CX43초표체.결과:경측서험증,선병독재체pAd-CX43-IRES2-EGFP구건성공.pAd-CX43-IRES2-EGFP병독적적도위:2.8×106 ifu/ml.전염인위암BGC-823세포후경Western blot검측도CX43단백초표체,내약기인MDR수도억제.결론:성공구건선병독재체pAd-CX43-IRES2-EGFP고효체외전염표체체계,검측기대인위암BGC-823세포계구유초표체CX43화억제내약기인MDR적작용,위CX43기인전염적연구급기우CX43위파표적기인약물사선평태적전정료기출.
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