实用预防医学
實用預防醫學
실용예방의학
PRACTICAL PREVENTIVE MEDICINE
2012年
11期
1615-1617
,共3页
胡燕%白冰珂%沈宏辉%侯俊%高蓉%罗声栋%貌盼勇
鬍燕%白冰珂%瀋宏輝%侯俊%高蓉%囉聲棟%貌盼勇
호연%백빙가%침굉휘%후준%고용%라성동%모반용
肠道病毒71型%VP1蛋白%原核表达
腸道病毒71型%VP1蛋白%原覈錶達
장도병독71형%VP1단백%원핵표체
目的 利用大肠杆菌原核表达系统表达肠道病毒71型强神经毒分离株VP1蛋白,为抗体制备和病毒诊断试剂盒的开发奠定基础.方法 利用一步法RT-PCR扩增出病毒VP1基因,构建重组原核表达质粒,IPTG诱导后经SDS-PAGE和Western blot验证蛋白表达的特异性.结果 重组质粒在1 mmol/L的IPTG 37℃诱导6h后可诱导表达得到约33 KD的蛋白,且表达的蛋白主要以不溶性的包涵体形式存在.VP1蛋白特异性单抗和His蛋白单抗验证了蛋白表达的特异性.结论 获得特异性的EV71病毒河南分离株VP1蛋白,可用于开发病毒诊断试剂盒.
目的 利用大腸桿菌原覈錶達繫統錶達腸道病毒71型彊神經毒分離株VP1蛋白,為抗體製備和病毒診斷試劑盒的開髮奠定基礎.方法 利用一步法RT-PCR擴增齣病毒VP1基因,構建重組原覈錶達質粒,IPTG誘導後經SDS-PAGE和Western blot驗證蛋白錶達的特異性.結果 重組質粒在1 mmol/L的IPTG 37℃誘導6h後可誘導錶達得到約33 KD的蛋白,且錶達的蛋白主要以不溶性的包涵體形式存在.VP1蛋白特異性單抗和His蛋白單抗驗證瞭蛋白錶達的特異性.結論 穫得特異性的EV71病毒河南分離株VP1蛋白,可用于開髮病毒診斷試劑盒.
목적 이용대장간균원핵표체계통표체장도병독71형강신경독분리주VP1단백,위항체제비화병독진단시제합적개발전정기출.방법 이용일보법RT-PCR확증출병독VP1기인,구건중조원핵표체질립,IPTG유도후경SDS-PAGE화Western blot험증단백표체적특이성.결과 중조질립재1 mmol/L적IPTG 37℃유도6h후가유도표체득도약33 KD적단백,차표체적단백주요이불용성적포함체형식존재.VP1단백특이성단항화His단백단항험증료단백표체적특이성.결론 획득특이성적EV71병독하남분리주VP1단백,가용우개발병독진단시제합.
