实用预防医学
實用預防醫學
실용예방의학
PRACTICAL PREVENTIVE MEDICINE
2012年
11期
1609-1611,1759
,共4页
白冰珂%胡燕%侯俊%沈宏辉%陆日北%罗声栋%黄维芝%柴艳涛%貌盼勇
白冰珂%鬍燕%侯俊%瀋宏輝%陸日北%囉聲棟%黃維芝%柴豔濤%貌盼勇
백빙가%호연%후준%침굉휘%륙일북%라성동%황유지%시염도%모반용
新型呼肠病毒%S1基因%σ1蛋白%重组原核表达质粒
新型呼腸病毒%S1基因%σ1蛋白%重組原覈錶達質粒
신형호장병독%S1기인%σ1단백%중조원핵표체질립
目的 构建新型呼肠病毒主要抗原蛋白的编码基因S1的重组原核表达质粒,对其在原核细胞内的表达进行研究.方法 将S1基因克隆入原核表达载体pProEX HTa,构建重组原核表达载体pPLS,通过IPTG诱导,利用蛋白电泳和蛋白免疫印迹等方法对其在大肠杆菌中的表达进行研究.结果 酶切分析表明重组质粒构建成功.SDS-PAGE 和Western-blot的检测结果一致表明,诱导后1～5h均可检测到目的蛋白的表达,其中以5h的蛋白表达量最大,且表达的目的蛋白主要以不溶性包涵体的形式存在.结论 通过构建重组原核表达质粒,可使目的蛋白σ1得到诱导表达,为后续抗体制备及研究病毒-宿主相互作用提供实验基础.
目的 構建新型呼腸病毒主要抗原蛋白的編碼基因S1的重組原覈錶達質粒,對其在原覈細胞內的錶達進行研究.方法 將S1基因剋隆入原覈錶達載體pProEX HTa,構建重組原覈錶達載體pPLS,通過IPTG誘導,利用蛋白電泳和蛋白免疫印跡等方法對其在大腸桿菌中的錶達進行研究.結果 酶切分析錶明重組質粒構建成功.SDS-PAGE 和Western-blot的檢測結果一緻錶明,誘導後1～5h均可檢測到目的蛋白的錶達,其中以5h的蛋白錶達量最大,且錶達的目的蛋白主要以不溶性包涵體的形式存在.結論 通過構建重組原覈錶達質粒,可使目的蛋白σ1得到誘導錶達,為後續抗體製備及研究病毒-宿主相互作用提供實驗基礎.
목적 구건신형호장병독주요항원단백적편마기인S1적중조원핵표체질립,대기재원핵세포내적표체진행연구.방법 장S1기인극륭입원핵표체재체pProEX HTa,구건중조원핵표체재체pPLS,통과IPTG유도,이용단백전영화단백면역인적등방법대기재대장간균중적표체진행연구.결과 매절분석표명중조질립구건성공.SDS-PAGE 화Western-blot적검측결과일치표명,유도후1～5h균가검측도목적단백적표체,기중이5h적단백표체량최대,차표체적목적단백주요이불용성포함체적형식존재.결론 통과구건중조원핵표체질립,가사목적단백σ1득도유도표체,위후속항체제비급연구병독-숙주상호작용제공실험기출.
