浙江临床医学
浙江臨床醫學
절강림상의학
ZHEJIANG CLINICAL MEDICAL JOURNAL
2012年
5期
516-518
,共3页
陈金明%周幽心%陈桂林%韦永新%吴庭枫
陳金明%週幽心%陳桂林%韋永新%吳庭楓
진금명%주유심%진계림%위영신%오정풍
胶质瘤干细胞%慢病毒%红色荧光蛋白
膠質瘤榦細胞%慢病毒%紅色熒光蛋白
효질류간세포%만병독%홍색형광단백
目的 探讨HIV-1来源的慢病毒载体介导红色荧光蛋白(RFP)基因转染人脑胶质瘤干细胞可行性和试验方法.方法用无血清干细胞培养基培养人脑胶质瘤干细胞,然后用细胞免疫荧光染色检测其干细胞特性表面标志物CD133、Nestin表达情况.以HIV-1来源的慢病毒为载体,以RFP基因为目的 的基因转染人脑胶质瘤干细胞,荧光显微镜下观察RFP阳性细胞表达情况及其转染率.MTT法检测转染后细胞与未转染RFP细胞组细胞增殖情况.再次用细胞免疫荧光染色检测转染后脑胶质瘤干细胞表面标志物CD133、Nestin表达情况.结果 红色荧光慢病毒转染胶质瘤干细胞体外连续培养后,RFP在干细胞中稳定表达,在荧光显微镜下即发出红色荧光,并且转染效率高.RFP- lentivirus转染后干细胞与未转染RFP组比较,生长曲线无明显差异,且转染后干细胞表面标志物仍表达阳性.结论 采用HIV-1来源的慢病毒载体介导以RFP基因为生物标记物标记人脑胶质瘤干细胞是可行的,以慢病毒转染对干细胞的生长影响小,转染效率高.
目的 探討HIV-1來源的慢病毒載體介導紅色熒光蛋白(RFP)基因轉染人腦膠質瘤榦細胞可行性和試驗方法.方法用無血清榦細胞培養基培養人腦膠質瘤榦細胞,然後用細胞免疫熒光染色檢測其榦細胞特性錶麵標誌物CD133、Nestin錶達情況.以HIV-1來源的慢病毒為載體,以RFP基因為目的 的基因轉染人腦膠質瘤榦細胞,熒光顯微鏡下觀察RFP暘性細胞錶達情況及其轉染率.MTT法檢測轉染後細胞與未轉染RFP細胞組細胞增殖情況.再次用細胞免疫熒光染色檢測轉染後腦膠質瘤榦細胞錶麵標誌物CD133、Nestin錶達情況.結果 紅色熒光慢病毒轉染膠質瘤榦細胞體外連續培養後,RFP在榦細胞中穩定錶達,在熒光顯微鏡下即髮齣紅色熒光,併且轉染效率高.RFP- lentivirus轉染後榦細胞與未轉染RFP組比較,生長麯線無明顯差異,且轉染後榦細胞錶麵標誌物仍錶達暘性.結論 採用HIV-1來源的慢病毒載體介導以RFP基因為生物標記物標記人腦膠質瘤榦細胞是可行的,以慢病毒轉染對榦細胞的生長影響小,轉染效率高.
목적 탐토HIV-1래원적만병독재체개도홍색형광단백(RFP)기인전염인뇌효질류간세포가행성화시험방법.방법용무혈청간세포배양기배양인뇌효질류간세포,연후용세포면역형광염색검측기간세포특성표면표지물CD133、Nestin표체정황.이HIV-1래원적만병독위재체,이RFP기인위목적 적기인전염인뇌효질류간세포,형광현미경하관찰RFP양성세포표체정황급기전염솔.MTT법검측전염후세포여미전염RFP세포조세포증식정황.재차용세포면역형광염색검측전염후뇌효질류간세포표면표지물CD133、Nestin표체정황.결과 홍색형광만병독전염효질류간세포체외련속배양후,RFP재간세포중은정표체,재형광현미경하즉발출홍색형광,병차전염효솔고.RFP- lentivirus전염후간세포여미전염RFP조비교,생장곡선무명현차이,차전염후간세포표면표지물잉표체양성.결론 채용HIV-1래원적만병독재체개도이RFP기인위생물표기물표기인뇌효질류간세포시가행적,이만병독전염대간세포적생장영향소,전염효솔고.
