动物医学进展
動物醫學進展
동물의학진전
PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE
2013年
7期
35-38
,共4页
陈佳%戚南山%廖申权%吴彩艳%吕敏娜%李娟%吴玄光%孙铭飞
陳佳%慼南山%廖申權%吳綵豔%呂敏娜%李娟%吳玄光%孫銘飛
진가%척남산%료신권%오채염%려민나%리연%오현광%손명비
柔嫩艾美耳球虫%二氢乳清酸脱氢酶%电子克隆%原核表达
柔嫩艾美耳毬蟲%二氫乳清痠脫氫酶%電子剋隆%原覈錶達
유눈애미이구충%이경유청산탈경매%전자극륭%원핵표체
二氢乳清酸脱氢酶(DHODH)是催化嘧啶从头合成途径中的关键酶,由于顶复门原虫等低等生物与其宿主的DHODH在分子结构上的差异,可以作为研发新型抗顶复门原虫药物的靶标而成为研究的热点.本研究利用电子克隆策略,以疟原虫DHODH氨基酸基因序列为信息探针,搜索球虫基因库(www.sanger,ac.uk/projects/E-tenella/),拼接注释了柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)DHODH的基因序列,以E.tenella广东株第2代裂殖子总RNA为模板,利用RT-PCR技术扩增获得EtDHODH ORF基因序列.构建重组表达载体pCold Ⅰ-EtDHODH,进行原核表达.测序结果显示,EtDHODH的基因大小为1254 bp,SDS-PAGE鉴定结果表明,目的蛋白约45 ku.本研究重组表达并纯化了EtDHODH基因,为建立以EtDHODH为靶点的抗球虫药物筛选奠定了基础.
二氫乳清痠脫氫酶(DHODH)是催化嘧啶從頭閤成途徑中的關鍵酶,由于頂複門原蟲等低等生物與其宿主的DHODH在分子結構上的差異,可以作為研髮新型抗頂複門原蟲藥物的靶標而成為研究的熱點.本研究利用電子剋隆策略,以瘧原蟲DHODH氨基痠基因序列為信息探針,搜索毬蟲基因庫(www.sanger,ac.uk/projects/E-tenella/),拼接註釋瞭柔嫩艾美耳毬蟲(Eimeria tenella)DHODH的基因序列,以E.tenella廣東株第2代裂殖子總RNA為模闆,利用RT-PCR技術擴增穫得EtDHODH ORF基因序列.構建重組錶達載體pCold Ⅰ-EtDHODH,進行原覈錶達.測序結果顯示,EtDHODH的基因大小為1254 bp,SDS-PAGE鑒定結果錶明,目的蛋白約45 ku.本研究重組錶達併純化瞭EtDHODH基因,為建立以EtDHODH為靶點的抗毬蟲藥物篩選奠定瞭基礎.
이경유청산탈경매(DHODH)시최화밀정종두합성도경중적관건매,유우정복문원충등저등생물여기숙주적DHODH재분자결구상적차이,가이작위연발신형항정복문원충약물적파표이성위연구적열점.본연구이용전자극륭책략,이학원충DHODH안기산기인서렬위신식탐침,수색구충기인고(www.sanger,ac.uk/projects/E-tenella/),병접주석료유눈애미이구충(Eimeria tenella)DHODH적기인서렬,이E.tenella엄동주제2대렬식자총RNA위모판,이용RT-PCR기술확증획득EtDHODH ORF기인서렬.구건중조표체재체pCold Ⅰ-EtDHODH,진행원핵표체.측서결과현시,EtDHODH적기인대소위1254 bp,SDS-PAGE감정결과표명,목적단백약45 ku.본연구중조표체병순화료EtDHODH기인,위건립이EtDHODH위파점적항구충약물사선전정료기출.
