动物医学进展
動物醫學進展
동물의학진전
PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE
2013年
7期
24-28
,共5页
陈建文%王兴叶%邵军军%郝春霞%常惠芸%胡永浩
陳建文%王興葉%邵軍軍%郝春霞%常惠蕓%鬍永浩
진건문%왕흥협%소군군%학춘하%상혜예%호영호
口蹄疫病毒%中和表位%牛IgG%重链恒定区
口蹄疫病毒%中和錶位%牛IgG%重鏈恆定區
구제역병독%중화표위%우IgG%중련항정구
为了研制广谱高效的A型口蹄疫新型多表位疫苗,根据GenBank数据库的A型代表毒株VP1序列设计并合成了VP1结构蛋白上的主要抗原表位DNA段,即135 aa～160 aa和200 aa～213 aa,与牛IgG重链恒定区编码基因连接,将合成的2个表位基因经Xho工、EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ酶切后依次克隆到pET-30a(+)载体上,构建重组质粒pRE2IgG,将其转化到大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞,以IPTG诱导表达融合蛋白pRE2IgG,对表达产物进行SDS-PAGE电泳分析,Western blot检测.结果显示,重组蛋白获得高效表达,并以包涵体形式存在,其分子质量约为60 ku,且能与抗A型FMDV阳性血清发生特异性反应,具有良好的反应活性.
為瞭研製廣譜高效的A型口蹄疫新型多錶位疫苗,根據GenBank數據庫的A型代錶毒株VP1序列設計併閤成瞭VP1結構蛋白上的主要抗原錶位DNA段,即135 aa～160 aa和200 aa～213 aa,與牛IgG重鏈恆定區編碼基因連接,將閤成的2箇錶位基因經Xho工、EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ酶切後依次剋隆到pET-30a(+)載體上,構建重組質粒pRE2IgG,將其轉化到大腸埃希菌BL21(DE3)感受態細胞,以IPTG誘導錶達融閤蛋白pRE2IgG,對錶達產物進行SDS-PAGE電泳分析,Western blot檢測.結果顯示,重組蛋白穫得高效錶達,併以包涵體形式存在,其分子質量約為60 ku,且能與抗A型FMDV暘性血清髮生特異性反應,具有良好的反應活性.
위료연제엄보고효적A형구제역신형다표위역묘,근거GenBank수거고적A형대표독주VP1서렬설계병합성료VP1결구단백상적주요항원표위DNA단,즉135 aa～160 aa화200 aa～213 aa,여우IgG중련항정구편마기인련접,장합성적2개표위기인경Xho공、EcoR Ⅰ화BamH Ⅰ매절후의차극륭도pET-30a(+)재체상,구건중조질립pRE2IgG,장기전화도대장애희균BL21(DE3)감수태세포,이IPTG유도표체융합단백pRE2IgG,대표체산물진행SDS-PAGE전영분석,Western blot검측.결과현시,중조단백획득고효표체,병이포함체형식존재,기분자질량약위60 ku,차능여항A형FMDV양성혈청발생특이성반응,구유량호적반응활성.
