CAJ | 학술논문

本研究旨在探讨胞壁酰二肽(muramyldipeptide,MDP)激活NOD2信号通路对白血病抗原致敏的树突状细胞(dendritic cells,DC)的免疫调控影响.采用梯度离心法获取健康人外周血单个核细胞(peripheral blood mononu-clear cells,PBMNC),体外给予3种细胞因子诱导培养7d,第5d给予白血病细胞株HL-60冻融抗原致敏DC,DC诱导成熟后,给予MDP(2000 ng/ml,24h)刺激各组细胞.应用RT-PCR和Western blot检测NOD2 mRNA和蛋白表达,流式细胞仪分析各组DC表面分子,ELISA法检测各组DC培养上清中IL-12和p40表达.结果显示:MDP作用于经不同方式处理的DC后,可以刺激NOD2 mRNA和蛋白的表达,并以负载白血病细胞株HL-60冻融抗原并给予MDP刺激DC组(致敏DC+ MDP组)最高,其显著高于仅给予MDP刺激无负载抗原DC组(DC+ MDP组)和无MDP刺激致敏DC组,差异有统计学意义(P＜0.05);DC表面分子(HLA-DR、CD80、CD83、CD86、CD40)在致敏DC+ MDP组表达明显高于DC+ MDP组和致敏DC组,未处理DC表达最低,差异有统计学意义(P＜0.05);同样地发现,致敏DC+ MDP组分泌细胞因子IL-12 p40最高为(898.30±61.08) pg/ml,显著高于DC+ MDP组(573.86±32.09) pg/ml和致敏DC组(365.03 ±28.86) pg/ml,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:MDP可明显上调致敏DC中NOD2 mRNA和蛋白表达,同时促进致敏DC表面HLA-DR、协同共刺激分子、黏附分子表达及炎性因子IL-12和p40分泌.本研究有望为DC在白血病免疫治疗中的应用提供新思路.
본연구지재탐토포벽선이태(muramyldipeptide,MDP)격활NOD2신호통로대백혈병항원치민적수돌상세포(dendritic cells,DC)적면역조공영향.채용제도리심법획취건강인외주혈단개핵세포(peripheral blood mononu-clear cells,PBMNC),체외급여3충세포인자유도배양7d,제5d급여백혈병세포주HL-60동융항원치민DC,DC유도성숙후,급여MDP(2000 ng/ml,24h)자격각조세포.응용RT-PCR화Western blot검측NOD2 mRNA화단백표체,류식세포의분석각조DC표면분자,ELISA법검측각조DC배양상청중IL-12화p40표체.결과현시:MDP작용우경불동방식처리적DC후,가이자격NOD2 mRNA화단백적표체,병이부재백혈병세포주HL-60동융항원병급여MDP자격DC조(치민DC+ MDP조)최고,기현저고우부급여MDP자격무부재항원DC조(DC+ MDP조)화무MDP자격치민DC조,차이유통계학의의(P＜0.05);DC표면분자(HLA-DR、CD80、CD83、CD86、CD40)재치민DC+ MDP조표체명현고우DC+ MDP조화치민DC조,미처리DC표체최저,차이유통계학의의(P＜0.05);동양지발현,치민DC+ MDP조분비세포인자IL-12 p40최고위(898.30±61.08) pg/ml,현저고우DC+ MDP조(573.86±32.09) pg/ml화치민DC조(365.03 ±28.86) pg/ml,차이유통계학의의(P＜0.05).결론:MDP가명현상조치민DC중NOD2 mRNA화단백표체,동시촉진치민DC표면HLA-DR、협동공자격분자、점부분자표체급염성인자IL-12화p40분비.본연구유망위DC재백혈병면역치료중적응용제공신사로.