中国实验血液学杂志
中國實驗血液學雜誌
중국실험혈액학잡지
JOURNAL OF EXPERIMENTAL HEMATOLOGY
2013年
6期
1563-1567
,共5页
杨燕美%李红%张雷%党瑞杰%李萍%王晓燕%朱恒%郭希民%张毅
楊燕美%李紅%張雷%黨瑞傑%李萍%王曉燕%硃恆%郭希民%張毅
양연미%리홍%장뢰%당서걸%리평%왕효연%주항%곽희민%장의
间充质干细胞%骨髓加骨片法%小鼠
間充質榦細胞%骨髓加骨片法%小鼠
간충질간세포%골수가골편법%소서
mesenchymal stem cell%bone marrow plus bone fragment%mouse
本研究旨在建立一种方便、快捷、有效体外分离培养小鼠骨髓间充质千细胞(mesenchymal stem cells,MSC)的方法.在无菌条件下取小鼠股骨、胫骨,分别用全骨髓贴壁法、骨片消化法、骨髓加骨片法分离小鼠MSC,比较MSC集落出现时间、大小及数量;应用流式细胞术检测细胞免疫表型,并进行MSC成骨、成脂分化鉴定.结果表明,骨髓加骨片法出现的集落时间最早,集落数量最多,第4天集落数为20±4个;骨片消化法为11.5±2.5个;全骨髓贴壁法最少,为9.5±1.5个;到第3代时,骨髓加骨片法获得细胞数量最多,是全骨髓贴壁法和骨片消化法的2倍;流式细胞术检测结果显示,获得的细胞高表达干细胞标志之一Sca-1,高表达CD44、CD29,不表达白细胞表面抗原CD45和内皮细胞标志CD31等;所分离的MSC在成骨诱导体系和成脂诱导体系中能分别向成骨细胞和脂肪细胞分化,具有典型的MSC特性.结论:骨髓加骨片法是一种方便、快捷、有效的小鼠骨髓MSC分离方法.
本研究旨在建立一種方便、快捷、有效體外分離培養小鼠骨髓間充質韆細胞(mesenchymal stem cells,MSC)的方法.在無菌條件下取小鼠股骨、脛骨,分彆用全骨髓貼壁法、骨片消化法、骨髓加骨片法分離小鼠MSC,比較MSC集落齣現時間、大小及數量;應用流式細胞術檢測細胞免疫錶型,併進行MSC成骨、成脂分化鑒定.結果錶明,骨髓加骨片法齣現的集落時間最早,集落數量最多,第4天集落數為20±4箇;骨片消化法為11.5±2.5箇;全骨髓貼壁法最少,為9.5±1.5箇;到第3代時,骨髓加骨片法穫得細胞數量最多,是全骨髓貼壁法和骨片消化法的2倍;流式細胞術檢測結果顯示,穫得的細胞高錶達榦細胞標誌之一Sca-1,高錶達CD44、CD29,不錶達白細胞錶麵抗原CD45和內皮細胞標誌CD31等;所分離的MSC在成骨誘導體繫和成脂誘導體繫中能分彆嚮成骨細胞和脂肪細胞分化,具有典型的MSC特性.結論:骨髓加骨片法是一種方便、快捷、有效的小鼠骨髓MSC分離方法.
본연구지재건립일충방편、쾌첩、유효체외분리배양소서골수간충질천세포(mesenchymal stem cells,MSC)적방법.재무균조건하취소서고골、경골,분별용전골수첩벽법、골편소화법、골수가골편법분리소서MSC,비교MSC집락출현시간、대소급수량;응용류식세포술검측세포면역표형,병진행MSC성골、성지분화감정.결과표명,골수가골편법출현적집락시간최조,집락수량최다,제4천집락수위20±4개;골편소화법위11.5±2.5개;전골수첩벽법최소,위9.5±1.5개;도제3대시,골수가골편법획득세포수량최다,시전골수첩벽법화골편소화법적2배;류식세포술검측결과현시,획득적세포고표체간세포표지지일Sca-1,고표체CD44、CD29,불표체백세포표면항원CD45화내피세포표지CD31등;소분리적MSC재성골유도체계화성지유도체계중능분별향성골세포화지방세포분화,구유전형적MSC특성.결론:골수가골편법시일충방편、쾌첩、유효적소서골수MSC분리방법.
