CAJ | 학술논문

本研究探讨大萼香茶菜甲素A(macrocalyxinA,MA)体外对多发性骨髓瘤细胞株蛋白酶体抑制作用及其诱导凋亡的分子机制.以不同浓度(2、4、8 μg/ml)的MA体外作用于U266细胞,用Hochest染色法和Annexin V/PI双染色观察MA诱导U266细胞凋亡作用;用Western blot检测泛素、蛋白酶体19S亚基S6’亚单位和蛋白酶体20S亚基中β1、β1i、β2、β2i、β5、β5i亚单位,以及BAD、BCL-2、FAS、FAS-L、MAPK、PARP、Pro-caspase 3、cleaved-caspase 3蛋白的表达.结果表明,随着MA作用时间的延长和剂量的增加,Hoechst 33258染色的细胞内出现致密颗粒或块状的荧光颗粒,Annexin V+/PI细胞和总凋亡细胞(AnnexinV+/PI和Annexin V +/PI+)增加;MA可使U266细胞内泛素化水平增高,抑制20S蛋白酶体亚单位β1i、β2、β5i、和19S蛋白酶体泛素识别亚基S6’表达.与此同时,BCL-2、MAPK、PARP、pro-caspase 3表达随着药物作用浓度的增高而下调,BAD、FAS、FAS-L、cleaved-caspase 3表达则增加.结论:大萼香茶菜甲素A具有抑制蛋白酶体的作用,线粒体凋亡和死亡受体途径有可能参与MA诱导细胞的凋亡.
본연구탐토대악향다채갑소A(macrocalyxinA,MA)체외대다발성골수류세포주단백매체억제작용급기유도조망적분자궤제.이불동농도(2、4、8 μg/ml)적MA체외작용우U266세포,용Hochest염색법화Annexin V/PI쌍염색관찰MA유도U266세포조망작용;용Western blot검측범소、단백매체19S아기S6’아단위화단백매체20S아기중β1、β1i、β2、β2i、β5、β5i아단위,이급BAD、BCL-2、FAS、FAS-L、MAPK、PARP、Pro-caspase 3、cleaved-caspase 3단백적표체.결과표명,수착MA작용시간적연장화제량적증가,Hoechst 33258염색적세포내출현치밀과립혹괴상적형광과립,Annexin V+/PI세포화총조망세포(AnnexinV+/PI화Annexin V +/PI+)증가;MA가사U266세포내범소화수평증고,억제20S단백매체아단위β1i、β2、β5i、화19S단백매체범소식별아기S6’표체.여차동시,BCL-2、MAPK、PARP、pro-caspase 3표체수착약물작용농도적증고이하조,BAD、FAS、FAS-L、cleaved-caspase 3표체칙증가.결론:대악향다채갑소A구유억제단백매체적작용,선립체조망화사망수체도경유가능삼여MA유도세포적조망.