CAJ | 학술논문

本研究旨在探讨葛根总黄酮(puerariae radix flavoues,PRF)对人急性单核细胞白血病细胞株SHI-1凋亡的影响及其可能分子机制.以不同浓度PRF在不同时间作用于SHI-1细胞,MTT检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞周期,实时定量PCR检测Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、Bcl-2及MLL-AF6融合基因mRNA的表达,Western blot检测MAPK、p-MAPK及NF-κB凋亡相关通路蛋白的表达,明胶酶谱法检测细胞培养上清中MMP的活性.结果表明,PRF呈时间-剂量依赖性抑制SHI-1细胞增殖,使细胞阻滞于S期.以25、50及75 μg/ml的PRF分别处理SHI-1细胞,Caspase-3、Caspase-8及Caspase-9在mRNA水平呈浓度依赖性上升(P＜0.05),Bcl-2呈浓度依赖性下降但差异无统计学意义(P＞0.05),而融合基因MLL-AF6的mRNA与对照组相比无明显变化.将不同浓度PRF作用于SHI-1细胞,胞内JNK、p-JNK、P38 MAPK及p-P38 MAPK的表达均呈浓度依赖性上升(P＜0.01);p-ERKv2及NF-κB的表达则呈浓度依赖性下降(P＜0.01);另细胞培养上清中MMP-2及MMP-9的活性在各处理组中基本不变.结论:一定浓度PRF可体外诱导SHI-1细胞的凋亡,具体分子机制可能与活化Caspases水解酶、激活MAPK、下调NF-κB及Bcl-2等信号分子有关,而与MLL-AF6融合基因无明显相关性.
본연구지재탐토갈근총황동(puerariae radix flavoues,PRF)대인급성단핵세포백혈병세포주SHI-1조망적영향급기가능분자궤제.이불동농도PRF재불동시간작용우SHI-1세포,MTT검측세포증식억제솔,류식세포술검측세포주기,실시정량PCR검측Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、Bcl-2급MLL-AF6융합기인mRNA적표체,Western blot검측MAPK、p-MAPK급NF-κB조망상관통로단백적표체,명효매보법검측세포배양상청중MMP적활성.결과표명,PRF정시간-제량의뢰성억제SHI-1세포증식,사세포조체우S기.이25、50급75 μg/ml적PRF분별처리SHI-1세포,Caspase-3、Caspase-8급Caspase-9재mRNA수평정농도의뢰성상승(P＜0.05),Bcl-2정농도의뢰성하강단차이무통계학의의(P＞0.05),이융합기인MLL-AF6적mRNA여대조조상비무명현변화.장불동농도PRF작용우SHI-1세포,포내JNK、p-JNK、P38 MAPK급p-P38 MAPK적표체균정농도의뢰성상승(P＜0.01);p-ERKv2급NF-κB적표체칙정농도의뢰성하강(P＜0.01);령세포배양상청중MMP-2급MMP-9적활성재각처리조중기본불변.결론:일정농도PRF가체외유도SHI-1세포적조망,구체분자궤제가능여활화Caspases수해매、격활MAPK、하조NF-κB급Bcl-2등신호분자유관,이여MLL-AF6융합기인무명현상관성.