CAJ | 학술논문

本研究旨在探讨大黄素(emodin)对人急性白血病HL-60/ADR耐药细胞多药耐药(multidrug resistance,MDR)逆转作用及其相应的作用机制.采用MTT法检测HL-60/ADR细胞对大黄素以及8种临床常用化疗药物的耐药性,比较大黄素联合化疗药物后对HL-60/ADR细胞耐药逆转效果,应用DNA倍体和DNA Ladder分析检测大黄素与阿霉素联合用药后细胞凋亡改变,RT-PCR和Western blot分别检测耐药相关基因和蛋白表达变化,流式细胞术检测大黄素处理后HL-60/ADR细胞内阿霉素荧光阳性率和柔红霉素平均荧光强度(MFI),激光共聚焦显微镜检测细胞内柔红霉素分布变化.结果表明:大黄素对HL-60/ADR耐药株和相应HL-60细胞敏感株的IC50值接近,分别为24.09±1.72 μmol/L和23.18±0.87μmol/L,对阿霉素(ADR)、柔红霉素(DNR)、依托泊苷(VP16)、长春新碱(VCR)、阿糖胞苷(Ara-C)、高三尖杉酯碱(HHT)、米托蒽醌(MTZ)和吡柔比星(THP)呈现不同程度耐药.小剂量大黄素对8种药物耐药逆转倍数介于1.58-4.12之间,其中对ADR的耐药细胞逆转效果最好.大黄素与ADR联合用药组可见明显的亚二倍体凋亡峰和典型的DNA降解梯状带形成.与单药组比较,联合用药组MRP1、TOPOⅡB、GSTπ、BCL-2耐药相关基因mRNA和蛋白表达水平下调明显,细胞内ADR和DNR蓄积水平增加,胞浆和胞核DNR分布增加,该作用与大黄素呈浓度依赖性.结论:大黄素具有逆转HL-60/ADR细胞多药耐药作用,其作用机制可能与下调耐药相关基因表达水平、增加细胞内化疗药物蓄积和促进细胞凋亡作用有关.
본연구지재탐토대황소(emodin)대인급성백혈병HL-60/ADR내약세포다약내약(multidrug resistance,MDR)역전작용급기상응적작용궤제.채용MTT법검측HL-60/ADR세포대대황소이급8충림상상용화료약물적내약성,비교대황소연합화료약물후대HL-60/ADR세포내약역전효과,응용DNA배체화DNA Ladder분석검측대황소여아매소연합용약후세포조망개변,RT-PCR화Western blot분별검측내약상관기인화단백표체변화,류식세포술검측대황소처리후HL-60/ADR세포내아매소형광양성솔화유홍매소평균형광강도(MFI),격광공취초현미경검측세포내유홍매소분포변화.결과표명:대황소대HL-60/ADR내약주화상응HL-60세포민감주적IC50치접근,분별위24.09±1.72 μmol/L화23.18±0.87μmol/L,대아매소(ADR)、유홍매소(DNR)、의탁박감(VP16)、장춘신감(VCR)、아당포감(Ara-C)、고삼첨삼지감(HHT)、미탁은곤(MTZ)화필유비성(THP)정현불동정도내약.소제량대황소대8충약물내약역전배수개우1.58-4.12지간,기중대ADR적내약세포역전효과최호.대황소여ADR연합용약조가견명현적아이배체조망봉화전형적DNA강해제상대형성.여단약조비교,연합용약조MRP1、TOPOⅡB、GSTπ、BCL-2내약상관기인mRNA화단백표체수평하조명현,세포내ADR화DNR축적수평증가,포장화포핵DNR분포증가,해작용여대황소정농도의뢰성.결론:대황소구유역전HL-60/ADR세포다약내약작용,기작용궤제가능여하조내약상관기인표체수평、증가세포내화료약물축적화촉진세포조망작용유관.