中国实验血液学杂志
中國實驗血液學雜誌
중국실험혈액학잡지
JOURNAL OF EXPERIMENTAL HEMATOLOGY
2013年
6期
1394-1398
,共5页
庄文越%李正祎%赵昀%岑建农%庄文卓%陈子兴
莊文越%李正祎%趙昀%岑建農%莊文卓%陳子興
장문월%리정의%조윤%잠건농%장문탁%진자흥
AML1-ETO融合蛋白%BCL-2%基因表达
AML1-ETO融閤蛋白%BCL-2%基因錶達
AML1-ETO융합단백%BCL-2%기인표체
AML1-ETO fusion protein%BCL-2%gene expression
本研究旨在观察AML1-ETO在白血病细胞中对于抗凋亡基因BCL-2表达的影响,探讨其在白血病发生中的作用.应用流式细胞术检测急性单核细胞白血病细胞株U937-WT、U937-Mock和经AML1-ETO基因转染的U937-A/E1-4的细胞凋亡率;使用免疫印迹法检测cleaved caspase-3蛋白的表达;荧光实时定量PCR检测转染细胞和对照组细胞以及AML-M2患者白血病细胞BCL-2 mRNA的表达;染色质免疫沉淀技术研究转染细胞中AML1-ETO与BCL-2基因启动子之间直接的相互作用情况.结果表明:AML1-ETO转染细胞的凋亡率明显增加,且检测到cleaved caspase-3蛋白的表达;转染了AML1-ETO的U937细胞系和具有AML1-ETO融合基因的AML-M2患者中,BCL-2的mRNA表达水平显著下调;转染细胞沉淀富集的AML1-ETO直接结合的DNA中含有BCL-2基因的启动子序列.结论:BCL-2是AML1-ETO的直接靶基因,AML1-ETO能下调BCL-2的表达.
本研究旨在觀察AML1-ETO在白血病細胞中對于抗凋亡基因BCL-2錶達的影響,探討其在白血病髮生中的作用.應用流式細胞術檢測急性單覈細胞白血病細胞株U937-WT、U937-Mock和經AML1-ETO基因轉染的U937-A/E1-4的細胞凋亡率;使用免疫印跡法檢測cleaved caspase-3蛋白的錶達;熒光實時定量PCR檢測轉染細胞和對照組細胞以及AML-M2患者白血病細胞BCL-2 mRNA的錶達;染色質免疫沉澱技術研究轉染細胞中AML1-ETO與BCL-2基因啟動子之間直接的相互作用情況.結果錶明:AML1-ETO轉染細胞的凋亡率明顯增加,且檢測到cleaved caspase-3蛋白的錶達;轉染瞭AML1-ETO的U937細胞繫和具有AML1-ETO融閤基因的AML-M2患者中,BCL-2的mRNA錶達水平顯著下調;轉染細胞沉澱富集的AML1-ETO直接結閤的DNA中含有BCL-2基因的啟動子序列.結論:BCL-2是AML1-ETO的直接靶基因,AML1-ETO能下調BCL-2的錶達.
본연구지재관찰AML1-ETO재백혈병세포중대우항조망기인BCL-2표체적영향,탐토기재백혈병발생중적작용.응용류식세포술검측급성단핵세포백혈병세포주U937-WT、U937-Mock화경AML1-ETO기인전염적U937-A/E1-4적세포조망솔;사용면역인적법검측cleaved caspase-3단백적표체;형광실시정량PCR검측전염세포화대조조세포이급AML-M2환자백혈병세포BCL-2 mRNA적표체;염색질면역침정기술연구전염세포중AML1-ETO여BCL-2기인계동자지간직접적상호작용정황.결과표명:AML1-ETO전염세포적조망솔명현증가,차검측도cleaved caspase-3단백적표체;전염료AML1-ETO적U937세포계화구유AML1-ETO융합기인적AML-M2환자중,BCL-2적mRNA표체수평현저하조;전염세포침정부집적AML1-ETO직접결합적DNA중함유BCL-2기인적계동자서렬.결론:BCL-2시AML1-ETO적직접파기인,AML1-ETO능하조BCL-2적표체.
