CAJ | 학술논문

本研究旨在建立一套血液恶性肿瘤的体外细胞培养模型.构建几种带有GFP(绿色荧光蛋白)表达并能够编码不同白血病/淋巴瘤相关融合蛋白的逆转录病毒载体(如:TEL-PDGFR,Rabaptin5-PDGFR,p210BCR-ABL,AML1-ETO,NPM-ALK);将病毒载体导入小鼠的原始骨髓细胞,转导的骨髓细胞随后培养在含有10％ FCS的IMDM中.将细胞分为:无生长因子组和含有不同生长因子的各种组合组:①c-kit联合flt3(KL+ FL)组,②IL-3+ TPO+G-CSF+ Hyper-IL-6 (3/T/G/H6)组,③KL+ FL+ 3/T/G/H6组.用流式细胞术检测肿瘤融合蛋白联合各种生长因子支持骨髓转导细胞的自我更新、扩增生长的能力.结果表明,转导的细胞能够持续对数级的生长扩增.KL联合FL能够支持转导编码TEL-PDGFR、Rabaptin5-PDGFR、AML1-ETO、NPM-ALK病毒载体的骨髓细胞自我更新、生长扩增;而转导p210 BCR-ABL病毒载体的骨髓细胞除需要KL和FL外,还需要IL-3的参与.扩增培养的细胞形态与所对应的肿瘤基因相关的血液肿瘤细胞相一致.结论:本研究建立了一套体外模型培养体系,提供了一种研究血液恶性肿瘤的方法,可用于筛选血液肿瘤的治疗性药物.
본연구지재건립일투혈액악성종류적체외세포배양모형.구건궤충대유GFP(록색형광단백)표체병능구편마불동백혈병/림파류상관융합단백적역전록병독재체(여:TEL-PDGFR,Rabaptin5-PDGFR,p210BCR-ABL,AML1-ETO,NPM-ALK);장병독재체도입소서적원시골수세포,전도적골수세포수후배양재함유10％ FCS적IMDM중.장세포분위:무생장인자조화함유불동생장인자적각충조합조:①c-kit연합flt3(KL+ FL)조,②IL-3+ TPO+G-CSF+ Hyper-IL-6 (3/T/G/H6)조,③KL+ FL+ 3/T/G/H6조.용류식세포술검측종류융합단백연합각충생장인자지지골수전도세포적자아경신、확증생장적능력.결과표명,전도적세포능구지속대수급적생장확증.KL연합FL능구지지전도편마TEL-PDGFR、Rabaptin5-PDGFR、AML1-ETO、NPM-ALK병독재체적골수세포자아경신、생장확증;이전도p210 BCR-ABL병독재체적골수세포제수요KL화FL외,환수요IL-3적삼여.확증배양적세포형태여소대응적종류기인상관적혈액종류세포상일치.결론:본연구건립료일투체외모형배양체계,제공료일충연구혈액악성종류적방법,가용우사선혈액종류적치료성약물.