CAJ | 학술논문

目的:应用多重连接依赖式探针扩增法(MLPA)和聚合酶链式限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)技术对30例临床疑似脊肌萎缩症(SMA)患者进行基因诊断,并对两种方法进行比较.方法:盐析方法提取30例家系成员外周血DNA,常规PCR方法扩增SMN7、8外显子,用DralⅠ和DralⅠ酶切PCR产物,琼脂糖凝胶电泳检测PCR及酶切产物.同时利用MLPA试剂盒P021方法进行验证比较.结果:经PCR-RFLP方法判断22例SMN1第7+8号外显子纯合缺失患儿和2例Ex7纯合缺失患儿,与MLPA方法一致；其余6例PCR-RFLP方法未见异常家系,经MLPA方法分析发现1例患儿和2例母亲为SMN1外显子7、8杂合缺失携带者；MLPA方法还在SMA家系中发现3例“2+0”型携带者.SMN2拷贝数在SMA患者中以4、5为主,携带者以2、3为主,正常人以1、2多见,其各拷贝数的频率分布在患者组与携带者组(x2=30.694)、患者组与正常人组(x2=21.997)中差异有统计学意义(P＜0.01),而在携带者与正常人组差异无统计学意义(x2=3.5,P＞ 0.05).结论:与PCR-RFLP相比,MLPA更加简单、准确、高效,还能够准确定量SMN1、SMN2,是一种高效的遗传病基因诊断方法.
목적:응용다중련접의뢰식탐침확증법(MLPA)화취합매련식한제성편단장도다태성분석(PCR-RFLP)기술대30례림상의사척기위축증(SMA)환자진행기인진단,병대량충방법진행비교.방법:염석방법제취30례가계성원외주혈DNA,상규PCR방법확증SMN7、8외현자,용DralⅠ화DralⅠ매절PCR산물,경지당응효전영검측PCR급매절산물.동시이용MLPA시제합P021방법진행험증비교.결과:경PCR-RFLP방법판단22례SMN1제7+8호외현자순합결실환인화2례Ex7순합결실환인,여MLPA방법일치；기여6례PCR-RFLP방법미견이상가계,경MLPA방법분석발현1례환인화2례모친위SMN1외현자7、8잡합결실휴대자；MLPA방법환재SMA가계중발현3례“2+0”형휴대자.SMN2고패수재SMA환자중이4、5위주,휴대자이2、3위주,정상인이1、2다견,기각고패수적빈솔분포재환자조여휴대자조(x2=30.694)、환자조여정상인조(x2=21.997)중차이유통계학의의(P＜0.01),이재휴대자여정상인조차이무통계학의의(x2=3.5,P＞ 0.05).결론:여PCR-RFLP상비,MLPA경가간단、준학、고효,환능구준학정량SMN1、SMN2,시일충고효적유전병기인진단방법.