中国实验血液学杂志
中國實驗血液學雜誌
중국실험혈액학잡지
JOURNAL OF EXPERIMENTAL HEMATOLOGY
2013年
5期
1237-1242
,共6页
郝一文%徐焕明%程大也%马怡然
郝一文%徐煥明%程大也%馬怡然
학일문%서환명%정대야%마이연
造血干细胞%活性氧%ATM基因%P21蛋白
造血榦細胞%活性氧%ATM基因%P21蛋白
조혈간세포%활성양%ATM기인%P21단백
hematopoietic stem cell%reactive oxygen species%ATM%P21
本研究探讨外周血造血干细胞移植中暴露于较高氧浓度环境下的外周血造血干细胞(PBHSC)内的异常增高的活性氧(reactive oxygen species,ROS)对其生物学功能造成损伤的机制.通过模拟骨髓平均氧浓度(5％O2)、静脉平均氧浓度(12％ O2)、动脉平均氧浓度(20％ O2)来培养骨髓造血干细胞(BMHSC),采用荧光探针检测细胞内ROS水平；流式细胞术分析不同细胞周期的细胞比例；Annexin V/PI双标记法检测细胞的凋亡情况；利用PCR技术检测细胞ATM基因表达；利用Western blot方法检测P21蛋白的表达.结果发现:与5％ O2对照组比较,12％ O2、20％O2组、氧浓度连续变化的5％-12％-20％O2组进入G1期、S期、G2/M期的细胞比例显著增加(P＜0.01)；细胞凋亡率显著增加(P＜0.01)；同步检测的ATM基因表达量明显低于对照组(P＜0.01)；P21蛋白表达量明显高于对照组(P＜0.01).结论:ROS通过ATM基因表达抑制和细胞周期蛋白P21活化,导致BMHSC的凋亡.
本研究探討外週血造血榦細胞移植中暴露于較高氧濃度環境下的外週血造血榦細胞(PBHSC)內的異常增高的活性氧(reactive oxygen species,ROS)對其生物學功能造成損傷的機製.通過模擬骨髓平均氧濃度(5％O2)、靜脈平均氧濃度(12％ O2)、動脈平均氧濃度(20％ O2)來培養骨髓造血榦細胞(BMHSC),採用熒光探針檢測細胞內ROS水平；流式細胞術分析不同細胞週期的細胞比例；Annexin V/PI雙標記法檢測細胞的凋亡情況；利用PCR技術檢測細胞ATM基因錶達；利用Western blot方法檢測P21蛋白的錶達.結果髮現:與5％ O2對照組比較,12％ O2、20％O2組、氧濃度連續變化的5％-12％-20％O2組進入G1期、S期、G2/M期的細胞比例顯著增加(P＜0.01)；細胞凋亡率顯著增加(P＜0.01)；同步檢測的ATM基因錶達量明顯低于對照組(P＜0.01)；P21蛋白錶達量明顯高于對照組(P＜0.01).結論:ROS通過ATM基因錶達抑製和細胞週期蛋白P21活化,導緻BMHSC的凋亡.
본연구탐토외주혈조혈간세포이식중폭로우교고양농도배경하적외주혈조혈간세포(PBHSC)내적이상증고적활성양(reactive oxygen species,ROS)대기생물학공능조성손상적궤제.통과모의골수평균양농도(5％O2)、정맥평균양농도(12％ O2)、동맥평균양농도(20％ O2)래배양골수조혈간세포(BMHSC),채용형광탐침검측세포내ROS수평；류식세포술분석불동세포주기적세포비례；Annexin V/PI쌍표기법검측세포적조망정황；이용PCR기술검측세포ATM기인표체；이용Western blot방법검측P21단백적표체.결과발현:여5％ O2대조조비교,12％ O2、20％O2조、양농도련속변화적5％-12％-20％O2조진입G1기、S기、G2/M기적세포비례현저증가(P＜0.01)；세포조망솔현저증가(P＜0.01)；동보검측적ATM기인표체량명현저우대조조(P＜0.01)；P21단백표체량명현고우대조조(P＜0.01).결론:ROS통과ATM기인표체억제화세포주기단백P21활화,도치BMHSC적조망.
