生物技术
生物技術
생물기술
BIOTECHNOLOGY
2012年
5期
36-39
,共4页
王鹏%热依汗古丽·阿里木%刘忠渊
王鵬%熱依汗古麗·阿裏木%劉忠淵
왕붕%열의한고려·아리목%류충연
光滑鳖甲%异长足漠甲%幼虫%RNA提取%方法选择与优化
光滑鱉甲%異長足漠甲%幼蟲%RNA提取%方法選擇與優化
광활별갑%이장족막갑%유충%RNA제취%방법선택여우화
目的:昆虫总RNA由于其自身结构特点,存在与动物植物完全不同的电泳条带,本文通过对比探索光滑鳖甲总RNA提取的最优方案.方法:实验采用5龄光滑鳖甲幼虫,利用TRIzol、CTAB、热酚法、及BioTeKe Kit、TianGen Kit试剂盒提取方法提取光滑鳖甲总RNA.结果:(1)所采用的实验方法提取的光滑鳖甲总RNA均呈现出与植物、哺乳动物血细胞、哺乳动物组织样总RNA不同的条带,28S弱于18S条带亮度；(2)TRIzol法、CTAB法、改进热酚法所得光滑鳖甲总RNA条带清晰、完整,D260/D280值为1.89 ～ 1.98,D260/D230值为1.94～2.09,纯度较好；(3) TRIzol法RNA提取得率为304.3 ～ 365.4μg/g,BioTeKe Kit RNA提取得率为73.38 ～ 128.22μg/g.结论:综合所有参数,所选取的方法中,TRIzol法可获得高质量、高产量的光滑鳖甲总RNA,可用于RT-PCR、文库构建等高要求RNA的提取.
目的:昆蟲總RNA由于其自身結構特點,存在與動物植物完全不同的電泳條帶,本文通過對比探索光滑鱉甲總RNA提取的最優方案.方法:實驗採用5齡光滑鱉甲幼蟲,利用TRIzol、CTAB、熱酚法、及BioTeKe Kit、TianGen Kit試劑盒提取方法提取光滑鱉甲總RNA.結果:(1)所採用的實驗方法提取的光滑鱉甲總RNA均呈現齣與植物、哺乳動物血細胞、哺乳動物組織樣總RNA不同的條帶,28S弱于18S條帶亮度；(2)TRIzol法、CTAB法、改進熱酚法所得光滑鱉甲總RNA條帶清晰、完整,D260/D280值為1.89 ～ 1.98,D260/D230值為1.94～2.09,純度較好；(3) TRIzol法RNA提取得率為304.3 ～ 365.4μg/g,BioTeKe Kit RNA提取得率為73.38 ～ 128.22μg/g.結論:綜閤所有參數,所選取的方法中,TRIzol法可穫得高質量、高產量的光滑鱉甲總RNA,可用于RT-PCR、文庫構建等高要求RNA的提取.
목적:곤충총RNA유우기자신결구특점,존재여동물식물완전불동적전영조대,본문통과대비탐색광활별갑총RNA제취적최우방안.방법:실험채용5령광활별갑유충,이용TRIzol、CTAB、열분법、급BioTeKe Kit、TianGen Kit시제합제취방법제취광활별갑총RNA.결과:(1)소채용적실험방법제취적광활별갑총RNA균정현출여식물、포유동물혈세포、포유동물조직양총RNA불동적조대,28S약우18S조대량도；(2)TRIzol법、CTAB법、개진열분법소득광활별갑총RNA조대청석、완정,D260/D280치위1.89 ～ 1.98,D260/D230치위1.94～2.09,순도교호；(3) TRIzol법RNA제취득솔위304.3 ～ 365.4μg/g,BioTeKe Kit RNA제취득솔위73.38 ～ 128.22μg/g.결론:종합소유삼수,소선취적방법중,TRIzol법가획득고질량、고산량적광활별갑총RNA,가용우RT-PCR、문고구건등고요구RNA적제취.
