中国医科大学学报
中國醫科大學學報
중국의과대학학보
JOURNAL OF CHINA MEDICAL UNIVERSITY
2009年
11期
820-823
,共4页
张梅英%吴红联%蔺美娜%李兆阳%周生来%于洋%王惟%吕相川%王禄增
張梅英%吳紅聯%藺美娜%李兆暘%週生來%于洋%王惟%呂相川%王祿增
장매영%오홍련%린미나%리조양%주생래%우양%왕유%려상천%왕록증
DJ-1基因%帕金森症%转基因小鼠
DJ-1基因%帕金森癥%轉基因小鼠
DJ-1기인%파금삼증%전기인소서
DJ-1%Parkinson disease%transgenic mouse
目的 探讨DJ-1~(L166P)突变基因在帕金森病发生中的作用.方法 构建pcDNA3.1-myc-his-DJ-1~(L166P)真核表达载体,利用显微注射方法将DJ-1~(L166P)基因片段(约3.9 kb)导入BDF1小鼠受精卵雄原核并移植到同期受孕的ICR假孕母鼠输卵管中,对产出仔鼠的鼠尾组织DNA进行聚合酶链反应和Southern blot检测,对Southern blot鉴定阳性的转基因小鼠进行逆转录聚合酶链反应和Western blot检测.结果 共产生20只子代小鼠,1号和7号为DJ-1~(L166P)转基因阳性小鼠.1号转基因小鼠大脑、小脑、肝、肺、肾、睾丸有不同程度的DJ-1 mRNA表达,均高于正常对照小鼠,但只有大脑中DJ-1 mRNA的表达水平显著高于正常对照小鼠(P<0.05);7号转基因小鼠只有肝、肺组织中有DJ-1 mRNA表达,也高于正常对照小鼠,但差异无统计学意义.只有1号小鼠大脑有His标签蛋白的表达.结论 成功获得1只DJ-1~(L166P)基因突变转基因小鼠模型,为课题的下一步实验研究打下良好的基础.
目的 探討DJ-1~(L166P)突變基因在帕金森病髮生中的作用.方法 構建pcDNA3.1-myc-his-DJ-1~(L166P)真覈錶達載體,利用顯微註射方法將DJ-1~(L166P)基因片段(約3.9 kb)導入BDF1小鼠受精卵雄原覈併移植到同期受孕的ICR假孕母鼠輸卵管中,對產齣仔鼠的鼠尾組織DNA進行聚閤酶鏈反應和Southern blot檢測,對Southern blot鑒定暘性的轉基因小鼠進行逆轉錄聚閤酶鏈反應和Western blot檢測.結果 共產生20隻子代小鼠,1號和7號為DJ-1~(L166P)轉基因暘性小鼠.1號轉基因小鼠大腦、小腦、肝、肺、腎、睪汍有不同程度的DJ-1 mRNA錶達,均高于正常對照小鼠,但隻有大腦中DJ-1 mRNA的錶達水平顯著高于正常對照小鼠(P<0.05);7號轉基因小鼠隻有肝、肺組織中有DJ-1 mRNA錶達,也高于正常對照小鼠,但差異無統計學意義.隻有1號小鼠大腦有His標籤蛋白的錶達.結論 成功穫得1隻DJ-1~(L166P)基因突變轉基因小鼠模型,為課題的下一步實驗研究打下良好的基礎.
목적 탐토DJ-1~(L166P)돌변기인재파금삼병발생중적작용.방법 구건pcDNA3.1-myc-his-DJ-1~(L166P)진핵표체재체,이용현미주사방법장DJ-1~(L166P)기인편단(약3.9 kb)도입BDF1소서수정란웅원핵병이식도동기수잉적ICR가잉모서수란관중,대산출자서적서미조직DNA진행취합매련반응화Southern blot검측,대Southern blot감정양성적전기인소서진행역전록취합매련반응화Western blot검측.결과 공산생20지자대소서,1호화7호위DJ-1~(L166P)전기인양성소서.1호전기인소서대뇌、소뇌、간、폐、신、고환유불동정도적DJ-1 mRNA표체,균고우정상대조소서,단지유대뇌중DJ-1 mRNA적표체수평현저고우정상대조소서(P<0.05);7호전기인소서지유간、폐조직중유DJ-1 mRNA표체,야고우정상대조소서,단차이무통계학의의.지유1호소서대뇌유His표첨단백적표체.결론 성공획득1지DJ-1~(L166P)기인돌변전기인소서모형,위과제적하일보실험연구타하량호적기출.
