热带病与寄生虫学
熱帶病與寄生蟲學
열대병여기생충학
TROPICAL DISEASES AND PARASITOLOGY
2012年
3期
128-131
,共4页
实时荧光定量聚合酶链式反应%相对定量%标准曲线%微小RNA
實時熒光定量聚閤酶鏈式反應%相對定量%標準麯線%微小RNA
실시형광정량취합매련식반응%상대정량%표준곡선%미소RNA
目的 比较实时荧光定量PCR的三种数据分析方法(2-△△CT、REST2009 和REST MCS) 的异同.方法 以正常小鼠来源的cDNA 混合物阳性对照为模板,5 倍系列稀释,分别做miRNA-181a 和Sn RNA U6 的标准曲线.实时荧光定量PCR检测正常组和哮喘组小鼠脾脏CD4+T 细胞miRNA-181a和Sn RNA U6 表达水平,以Sn RNA U6 为内参基因,采用2-△△CT、REST2009 和REST MCS 方法,对正常组和哮喘组miRNA-181a 进行相对定量分析.结果 5倍系列稀释法制作的标准曲线提示miRNA-181a 和Sn RNA U6 基因扩增效率分别为99.8%和99.9%,采用2-△△CT提示,REST2009 软件分析,RESTMCS 软件分析,皆表明哮喘组miRNA-181a 的表达量为正常组的2.92 倍,但是三种方法在适用条件、分析数据的多少等方面存在一定的区别.结论 三种数据分析方法各有特点,可根据研究者本人的实验要求选择合适的方法.
目的 比較實時熒光定量PCR的三種數據分析方法(2-△△CT、REST2009 和REST MCS) 的異同.方法 以正常小鼠來源的cDNA 混閤物暘性對照為模闆,5 倍繫列稀釋,分彆做miRNA-181a 和Sn RNA U6 的標準麯線.實時熒光定量PCR檢測正常組和哮喘組小鼠脾髒CD4+T 細胞miRNA-181a和Sn RNA U6 錶達水平,以Sn RNA U6 為內參基因,採用2-△△CT、REST2009 和REST MCS 方法,對正常組和哮喘組miRNA-181a 進行相對定量分析.結果 5倍繫列稀釋法製作的標準麯線提示miRNA-181a 和Sn RNA U6 基因擴增效率分彆為99.8%和99.9%,採用2-△△CT提示,REST2009 軟件分析,RESTMCS 軟件分析,皆錶明哮喘組miRNA-181a 的錶達量為正常組的2.92 倍,但是三種方法在適用條件、分析數據的多少等方麵存在一定的區彆.結論 三種數據分析方法各有特點,可根據研究者本人的實驗要求選擇閤適的方法.
목적 비교실시형광정량PCR적삼충수거분석방법(2-△△CT、REST2009 화REST MCS) 적이동.방법 이정상소서래원적cDNA 혼합물양성대조위모판,5 배계렬희석,분별주miRNA-181a 화Sn RNA U6 적표준곡선.실시형광정량PCR검측정상조화효천조소서비장CD4+T 세포miRNA-181a화Sn RNA U6 표체수평,이Sn RNA U6 위내삼기인,채용2-△△CT、REST2009 화REST MCS 방법,대정상조화효천조miRNA-181a 진행상대정량분석.결과 5배계렬희석법제작적표준곡선제시miRNA-181a 화Sn RNA U6 기인확증효솔분별위99.8%화99.9%,채용2-△△CT제시,REST2009 연건분석,RESTMCS 연건분석,개표명효천조miRNA-181a 적표체량위정상조적2.92 배,단시삼충방법재괄용조건、분석수거적다소등방면존재일정적구별.결론 삼충수거분석방법각유특점,가근거연구자본인적실험요구선택합괄적방법.
